[发明专利]用于培养神经细胞的装置、用于培养神经细胞的方法、培养的神经细胞、用于分析和鉴定轴突束中蛋白质的方法、以及用于使用神经细胞的方法

说明书

为了使从神经细胞延伸的轴突束在体外迅速生长，本发明是用于培养具有轴突之神经细胞的装置，其具有：培养板；以及放置在所述培养板中的多个模块，每个模块包含至少一个能够接收神经细胞胞体的第一室、至少一个第二室、以及至少一个能够接收从所述胞体延伸的轴突束并且连接所述第一室和所述第二室的通道；所述第一室、所述第二室和所述通道的底端封闭，并且所述第一室和所述第二室的顶端开放。

技术领域

本公开内容一般地涉及神经元培养装置、神经元培养方法、培养的神经元、轴突束中蛋白质的分析和鉴定、以及培养的神经元的使用。

背景技术

有必要在体外培养神经元和轴突用于迅速开发有效针对神经障碍的药物产品。迄今为止，已经提出了一些用于培养神经元和轴突的装置(参见，非专利文献1和专利文献1)。这些装置是具有多个隔室的微流体培养平台，并且能够促进轴突生长以分离轴突。

引用列表

非专利文献

非专利文献1：Taylor，Anne M等，“A Microfluidic Culture Platform for CNSAxonal Injury，Regeneration and Transport”Nature methods 2.8(2005)： 599-605.PMC.Web.8 Mar.2016。

专利文献

专利文献1：US 2004/0106192 A1

发明内容

技术问题

然而，上述方法并未令人完全满意。对于在这种药物筛选的情况中对神经组织的精确评价，尽管有必要分别评价胞体、轴突和胞体与轴突的接合部分，但上述方法的任一种都不能实现在空间上将它们的每一个分离并评价它们。

本公开内容的一个潜在益处是其可提供在体外迅速形成从神经元延伸之轴突束的神经元培养装置。

问题的解决方案

所示出的实施方案包括用于培养具有轴突之神经元的装置，所述装置包含：培养板；以及布置在所述培养板中的多个模块，每个模块包含至少一个可容纳神经元胞体的第一室、至少一个第二室、以及至少一个可容纳从胞体延伸之轴突束的通道，该通道连接第一室和第二室，其中第一室、第二室和通道的底端封闭，并且第一室和第二室的顶端开放。

在该装置的另一个实施方案中，培养液被容纳在第一室、第二室和通道中，第二室的顶端由至少一个密封构件封闭。

在该装置的另一个实施方案中，第二室可容纳骨骼肌，使得从胞体延伸的轴突束与骨骼肌接合。

在该装置的又一个实施方案中，通道的宽度为100至150[μm]，且高度为100至200[μm]。

另一个所示出的实施方案包括用于培养具有轴突之神经元的方法，该方法包括以下步骤：将培养液施加到至少一个第一室、至少一个第二室、以及至少一个连接第一室和第二室的通道中，第一室、第二室和通道包含在布置在培养板中的至少一个模块中；在第一室中接种神经元；以及培养该神经元，使轴突束在每个通道中生长并延伸。

在该方法的另一个实施方案中，将骨骼肌接种在至少一个第二室中，使得从神经元延伸的轴突束与骨骼肌接合。

另一个所示出的实施方案包括通过在培养液中接种而培养的多个神经元，该神经元包含胞体和至少一个沿预定方向从该胞体延伸的轴突束。

在神经元的另一个实施方案中，胞体、轴突束和轴突末端在空间上是分离的。

在神经元的另一个实施方案中，神经元是球状体形式，轴突束是可伸展的。

在神经元的另一个实施方案中，轴突束与骨骼肌接合。