[发明专利]反应容器及生物化学分析方法

说明书

本发明的反应容器具备：具有在第一表面上开口的多个凹部的透明的基材；和红外线吸收性的盖构件，其按照成为在所述第一表面中含有所述多个凹部的区域的内侧、在该盖构件与所述第一表面之间空有间隙的状态的方式，在所述区域的外侧焊接在所述基材上，所述盖构件能够将可见光波长区域中的至少一部分范围的光透射。

技术领域

本发明涉及反应容器及生物化学分析方法。

本申请基于2016年4月27日在日本申请的特愿2016-089362号主张优先权，将其内容援引于此。

背景技术

一直以来已知通过对生物体分子进行解析来进行疾病或体质的诊断。

例如，已知有利用DNA内记录的单核苷酸多态性(Single NucleotidePolymorphism：SNP)解析进行的体质诊断、利用体细胞突变解析进行的抗癌药的投予判断、利用病毒的蛋白质解析进行的感染症应对等。

例如，对于癌症的治疗药物，教示了通过在EGFR-TKI(酪氨酸激酶抑制剂)的投予前后对EGFR(表皮生长因子受体)基因突变的扩增量(拷贝数)进行定量，可以成为治疗效果的指标。以往一直进行使用了实时PCR(聚合酶链反应)的定量，但知道了检查中使用的核酸的总量发生变化会对定量性造成影响，目前开发出了核酸的总量不会影响定量性的数字PCR技术。

数字PCR技术是指将PCR试剂与核酸的混合物分割成多个微小液滴、对这些微小液滴进行以混合物中的核酸中成为检测对象的核酸为模板的PCR扩增、从而由含有模板核酸的微小液滴检测出因PCR扩增所产生的荧光等信号、计算微小液滴总数中检测到信号的微小液滴的比例、由此对试样中的核酸进行定量的数字解析技术之一。

数字解析技术需要用于将与混合物及微小液滴结合而发光的荧光珠粒密封、且可利用显微镜进行读取的密封容器。在该密封的容器内，为了能够分别地辨别各荧光珠粒和液滴，在容器内的底面上均等地配置收纳珠粒的微小孔穴，按照珠粒收纳在各个孔穴内的方式进行流入和密封。

数字PCR中，按照存在于1个微小液滴内的成为模板的核酸为0个～1个的方式，将PCR反应试剂与核酸的混合物进行了稀释。数字PCR中，为了提高核酸扩增的灵敏度，并且为了对多个微小液滴同时地进行核酸扩增，优选各微小液滴的体积小。例如，专利文献1中公开了按照各孔的容积达到6nl(纳升)的方式形成的微阵列状的反应容器。另外，专利文献2中公开了下述方法：对在流路内形成有多个深度为3μm、直径为5μm的孔的微阵列、向流路内流入试样并将试样导入至各孔内之后，利用密封液挤出流路内的剩余试剂，从而向各孔内导入试样。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第2013/151135号

专利文献2：国际公开第2014/007190号

发明内容

发明要解决的技术问题

具有流路的微阵列状的反应容器可以通过对多个树脂构件进行焊接来制造。数字PCR等数字解析技术中，有时使用可见光或荧光对反应容器内的反应状态进行观察，对反应容器有时要求透光性。作为以高精度将树脂构件之间进行焊接的技术，已知将具有透光性的树脂构件和具有光吸收性的树脂构件进行激光焊接的激光透射焊接法。但是，通过激光透射焊接法焊接得到的多个树脂构件由于含有带有光吸收性的树脂构件，因此作为整体的透光性低，在进行使用了可见光的明视野观察时，存在视野变暗的问题。

本发明鉴于上述事实而作出，其目的在于提供能够以高精度对具有透光性的树脂进行焊接、同时能够获得明视野观察下的充分亮度的反应容器；以及使用了该反应容器的生物化学分析方法。

用于解决技术问题的手段