[发明专利]产生不含聚集物的单体白喉毒素融合蛋白的方法和治疗用途

权利要求书

1.一种DNA表达载体，其包含：

a.toxP；

b.阻断Fe介导的基因表达调控的突变toxO；和

c.编码蛋白质的DNA序列，

其中所述toxP和所述突变toxO调控编码所述蛋白质的DNA区段的表达。

2.如权利要求1所述的DNA表达载体，其进一步包含编码信号肽的DNA序列。

3.如权利要求2所述的DNA表达载体，其中所述蛋白质连接于所述信号肽。

4.如权利要求1所述的DNA表达载体，其中所述突变toxO是SEQ ID NO:1。

5.如权利要求2所述的DNA表达载体，其中所述信号肽是SEQ ID NO:5。

6.如权利要求1所述的DNA表达载体，其中所述蛋白质选自由CRM 197、CRM 107或其组合组成的组。

7.如权利要求6所述的DNA表达载体，其中所述蛋白质选自SEQ ID NO:11、7至20中的任一者。

8.如权利要求1所述的DNA表达载体，其中所述蛋白质包含连接于受体结合蛋白或其功能性部分的白喉毒素或其功能性部分。

9.如权利要求8所述的DNA表达载体，其中所述受体结合蛋白选自包括以下的组：IL-2、IL-3、IL-4、IL-6、IL-7、IL-15、EGF、FGF、P物质、CD4、αMSH、GRP、TT片段C、GCSF、调蛋白β1、其功能性部分或其组合。

10.如权利要求8所述的DNA表达载体，其中所述蛋白质选自SEQ ID NO:12-15中的任一者。

11.一种DNA表达载体，其包含：

a.toxP；

b.阻断Fe介导的基因表达调控的突变toxO；

c.编码蛋白质的DNA序列，所述蛋白质包含

i.信号序列；

ii.白喉毒素或其功能性部分，其不含白喉受体结合结构域或具有非功能性白喉毒素受体结合结构域，和

iii.靶标受体结合结构域，其选自包括以下的组：IL-2、IL-3、IL-4、IL-6、IL-7、IL-15、EGF、FGF、P物质、CD4、αMSH、GRP、TT片段C、GCSF、调蛋白β1、其功能性部分或其组合，

其中所述toxP和所述突变toxO调控编码所述蛋白质的所述DNA序列的表达。

12.如权利要求11所述的DNA表达载体，其中用所述DNA表达载体转化的细菌产生连接于信号肽的白喉毒素受体结合融合蛋白，其由所述信号肽引导至周质、培养基或这两个位置。

13.如权利要求12所述的DNA表达载体，其中所述细菌是大肠埃希氏菌，并且所述信号肽将所述白喉毒素受体结合融合蛋白引导至所述周质。

14.如权利要求12所述的DNA表达载体，其中所述细菌是白喉棒杆菌，并且所述信号肽将所述白喉毒素受体结合融合蛋白引导至所述培养基。

15.如权利要求11所述的DNA表达载体，其包含SEQ ID NO:3。

16.如权利要求12所述的DNA表达载体，其进一步包含编码可裂解蛋白质标签的DNA。

17.如权利要求12所述的DNA表达载体，其中所述可裂解蛋白质标签连接于所述白喉毒素受体结合融合蛋白。

18.如权利要求11所述的DNA载体，其中所述白喉毒素受体结合融合蛋白选自SEQ IDNo:12至15中的任一者。