[发明专利]基于使用表达增强性基因座来制备抗体的组合物和方法

权利要求书

1.一种细胞，其包含

整合在第一表达增强的基因座中的第一外源核酸；以及整合在第二表达增强的基因座中的第二外源核酸；

其中所述第一外源核酸和所述第二外源核酸共同编码抗原结合蛋白；并且

其中两个表达增强的基因座之一的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，并且两个表达增强的基因座中的另一个的核苷酸序列如SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示。

2.如权利要求1所述的细胞，其中所述第一外源核酸包含编码第一重链片段(HCF)的核苷酸序列，并且所述第二外源核酸包含编码轻链片段(LCF)的核苷酸序列。

3.如权利要求2所述的细胞，其中所述第二外源核酸还包含编码第二HCF的核苷酸序列。

4.如权利要求3所述的细胞，其中所述第一HCF和所述第二HCF不同。

5.如权利要求3所述的细胞，其中编码所述第一HCF的所述核苷酸序列编码第一CH3结构域，并且其中编码所述第二HCF的所述核苷酸序列编码第二CH3结构域。

6.如权利要求5所述的细胞，其中所述第一CH3结构域和所述第二CH3结构域的差异在于至少一个氨基酸位置。

7.如权利要求5所述的细胞，其中编码所述第一CH3结构域和所述第二CH3结构域的所述核苷酸序列彼此的差异在于所述核苷酸序列之一已经经过密码子修饰。

8.如权利要求3所述的细胞，其中所述第一外源核酸还包含编码第二LCF的核苷酸序列。

9.如权利要求8所述的细胞，其中所述第一LCF和第二LCF包含相同的氨基酸序列。

10.如权利要求2、3、8中任一项所述的细胞，其中编码HCF或LCF的所述核苷酸序列中的每一者可操作地连接至启动子。

11.如权利要求2所述的细胞，其中第一重组酶识别位点(RRS)和第二RRS相对于所述第一外源核酸分别位于5'和3'，并且第三RRS和第四RRS相对于所述第二外源核酸分别位于5'和3'，其中所述第一RRS和所述第二RRS不同，并且所述第三RRS和所述第四RRS不同。

12.如权利要求11所述的细胞，其中所述第一RRS、所述第二RRS、所述第三RRS和所述第四RRS彼此不同。

13.如权利要求3所述的细胞，其中第一附加RRS存在于编码所述第一LCF的所述核苷酸序列与编码所述第二HCF的所述核苷酸序列之间，其中所述附加RRS与所述第一RRS、所述第二RRS、所述第三RRS和所述第四RRS中的每一者不同。

14.如权利要求8所述的细胞，其中第一RRS和第二RRS相对于所述第一外源核酸分别位于5'和3'，并且第三RRS和第四RRS相对于所述第二外源核酸分别位于5'和3'，其中所述第一RRS和所述第二RRS不同，并且所述第三RRS和所述第四RRS不同。

15.如权利要求14所述的细胞，其中所述第一HCF和所述第二HCF相同，并且所述第一LCF和所述第二LCF相同，并且其中所述第一RRS和所述第三RRS相同，并且所述第二RRS和所述第四RRS相同。

16.如权利要求14所述的细胞，其中所述第一HCF和所述第二HCF不同，并且所述第一LCF和所述第二LCF相同，并且其中所述第一RRS、所述第二RRS、所述第三RRS和所述第四RRS彼此不同。