[发明专利]经修饰的六酰化奈瑟球菌LPS

权利要求书

1.一种以下成分的混合物：

i)一种具有六酰化的脂质A部分的奈瑟球菌LPS，其中与野生型奈瑟球菌LPS的脂质A部分相比，所述六酰化的脂质A部分是经修饰的，因为它具有棕榈油酰基(代替月桂酰基)作为与在所述脂质A部分的非还原末端处的葡糖胺上的一级酰基链结合的二级酰基链，并且其中除了所述六酰化的脂质A部分外，LPS具有脑膜炎奈瑟球菌、淋病奈瑟球菌或乳糖奈瑟球菌的LPS结构；以及

ii)具有五酰化的脂质A部分的奈瑟球菌LPS，其中与野生型奈瑟球菌LPS的脂质A部分相比，所述五酰化的脂质A部分是经修饰的，因为它缺少与在所述脂质A部分的非还原末端处的葡糖胺上的一级酰基链结合的二级酰基链，并且其中除了五酰化的脂质A部分之外，LPS具有脑膜炎奈瑟球菌、淋病奈瑟球菌或乳糖奈瑟球菌的LPS结构；

其中所述六酰化的脂质A部分具有式(I)的结构：

其中所述五酰化的脂质A部分具有式(II)的结构：

其中R₁和R₂独立地是-P(O)(OH)₂、-[P(O)(OH)-O]₂-H、-[P(O)(OH)-O]₂-CH₂CH₂NH₂、-[P(O)(OH)-O]₃-CH₂CH₂NH₂、-[P(O)(OH)-O]₃-H或-P(O)(OH)-O-CH₂CH₂NH₂；

其中所述混合物包含摩尔比在1:400至1:1.25范围内的六酰化奈瑟球菌LPS和五酰化奈瑟球菌LPS。

2.根据权利要求1的混合物，其中所述脑膜炎奈瑟球菌、淋病奈瑟球菌或乳糖奈瑟球菌是lgtB^-和galE^-中的至少一种。

3.根据权利要求1或2的混合物，其中所述脑膜炎奈瑟球菌是血清群B和免疫型L3中的至少一种。

4.一种包含权利要求1-3中任一项的混合物的奈瑟球菌属的遗传修饰的细菌，其中所述细菌包括：

a)降低或消除由内源lpxL1基因编码的脂质A生物合成月桂酰酰基转移酶活性的遗传修饰，其中所述内源lpxL1基因是编码LpxL1蛋白的基因，所述LpxL1蛋白具有与SEQ ID NO：1-3中的至少一个具有至少90％序列同一性的氨基酸序列；和，

b)对所述细菌赋予脂质A生物合成棕榈油酰基酰基转移酶活性的遗传修饰，其中所述遗传修饰是引入异源lpxP基因的表达的遗传修饰，所述异源lpxP基因具有编码与SEQ IDNO：4-10中的至少一个具有至少89％的氨基酸序列同一性的LpxP脂质A棕榈油酰基酰基转移酶的核苷酸序列；

并且其中所述细菌在20-42℃范围内的温度下培养。

5.根据权利要求4的遗传修饰的细菌，其中所述细菌是遗传修饰的脑膜炎奈瑟球菌、淋病奈瑟球菌或乳糖奈瑟球菌。

6.根据权利要求4的遗传修饰的细菌，其中所述内源lpxL1基因是编码LpxL1蛋白的基因，所述LpxL1蛋白具有SEQ ID NO：1-3中的至少一个的氨基酸序列。

7.根据权利要求4的遗传修饰的细菌，其中对所述细菌赋予脂质A生物合成棕榈油酰基酰基转移酶活性的遗传修饰是引入异源lpxP基因的表达的遗传修饰，所述异源lpxP基因具有编码SEQ ID NO：4-10中的至少一个的氨基酸序列的LpxP脂质A棕榈油酰基酰基转移酶的核苷酸序列。

8.根据权利要求4的遗传修饰的细菌，其中所述细菌被进一步遗传修饰以表达异源抗原。

9.根据权利要求8的遗传修饰的细菌，其中所述异源抗原在所述细菌的细胞外外膜表面上表达。