[发明专利]用于冷冻保存HUTC的组合物和方法

说明书

本发明提供了用于冷冻保存人脐带组织衍生的细胞的组合物。所述冷冻保存组合物可包含：(a)氨基酸；(b)维生素；(c)无机盐；以及(d)DMSO、蔗糖、甘露糖醇和乳糖酸。本发明还提供包含所述组合物和人脐带组织衍生的细胞的试剂盒以及冷冻保存所述细胞的方法，所述方法利用所述组合物。

相关申请的交叉引用

本申请要求美国临时申请62/278,780(2016年1月14日提交)的优先权，该美国临时申请的内容全文以引用方式并入本文。

技术领域

本专利申请涉及可用于冷冻保存人脐带组织衍生的细胞(hUTC)的组合物和利用这些组合物冷冻保存hUTC的方法。

背景技术

对于同种异体细胞治疗产品而言，细胞或组织得自供体，其在施用于患者之前被进一步操纵。非同源细胞治疗产品的制造方法通常包括以下步骤：解冻和扩增细胞；浓缩细胞并去除不期望的杂质，诸如在细胞生产期间使用的血清和胰蛋白酶；将细胞构成最终制剂缓冲液；以及冷冻保存细胞或产物。一旦在临床场所，就将冷冻保存的产品解冻并施用于受体。产品在适用于受体之前和期间保留在冷冻保存制剂中。

冷冻保存是通过冷却至零度以下温度来保存细胞或整个组织的方法。在这些寒冷的温度下，任何生物活性，包括可导致细胞死亡的生化反应均有效地停止。然而，已知冷冻保存对冷冻细胞造成损伤，从而影响细胞存活。冷冻保存期间的细胞存活能力通过解冻之后的细胞恢复和活力来测量。冷冻保存期间的细胞存活可受过程变量，诸如例如冷冻保存制剂、冷冻循环和程序、以及解冻程序显著影响。此外，在冷冻保存期间可能对细胞造成损伤的现象主要发生在冷冻阶段期间，并且包括但不限于溶液效应、细胞外冰形成、脱水和细胞内冰形成。为避免这种损伤，使用针对待保存的细胞独特设计的冷冻保存溶液。使用此类冷冻保护剂保护细胞免受在冷却或解冻期间由于冷冻而造成的损伤。

因此，重要的是也被用作递送产品的载体的最终冷冻保存制剂能够在解冻期间支撑并保持高细胞存活能力并保留产品完整性。该制剂对施用于受体而言还需要是安全的。此外，冷冻保存制剂应当在长时间段内支持产品稳定性。

需要一种可用于冷冻保存人脐带组织衍生的细胞的组合物，其保持功能性和治疗有效性。

发明内容

本发明的一个实施方案是适用于冷冻保存脐带组织衍生的细胞的组合物，该组合物包含：(1)氨基酸：L-精氨酸、L-谷氨酰胺、甘氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸(HCl)、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸和L-缬氨酸；(2)维生素：D-泛酸钙、氯化胆碱、叶酸、烟酰胺、吡哆醇(HCl)、核黄素和硫胺素(HCl)；(3)无机盐：氯化钾(USP)、碳酸氢钠(USP)、氯化钠(USP)和磷酸钠(一碱，H₂O)；以及(4)DMSO、右旋糖(无水，USP)、蔗糖和甘露糖醇。