[发明专利]细胞培养

权利要求书

1.一种分离的3维肝球状体，其中所述球状体具有：

与在单独完全William's E培养基中培养的3维肝球状体相比增加的ATP含量；

与在单独完全William's E培养基中培养的3维肝球状体相比相同或增加的细胞色素P450 1A1和细胞色素P450 1B1活性；以及

与在单独William's E培养基中培养的3维肝球状体相比增加的白蛋白分泌。

2.一种用于3维多器官培养系统中的分离的3维肝球状体，所述系统通过或可通过如下方法获得，所述方法包括：

将3维肝球状体在包括以下或由以下组成或基本上由以下组成的细胞培养基中培养：(a)完全PneumaCult-ALI培养基；或(b)完全B-ALI培养基；或(c)完全PneumaCult-ALI培养基和完全William's E培养基或(d)完全B-ALI培养基和完全William's E培养基，历时足以获得如下3维肝球状体的时间，其中：

与在单独完全William's E培养基中培养的3维肝球状体相比，ATP含量增加；

与在单独完全William's E培养基中培养的3维肝球状体相比，细胞色素P450 1A1和细胞色素P450 1B1活性相同或有所增加；以及

与在单独完全William's E培养基中培养的3维肝球状体相比，白蛋白分泌有所增加。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的分离的3维肝球状体，其中所述球状体是或来源于人类肝祖细胞系，适当地，其中所述球状体是或来源于HepaRG细胞。

4.根据权利要求1或权利要求3所述的分离的3维肝球状体，其中所述球状体在包括以下或由以下组成或基本上由以下组成的细胞培养基中培养：(a)完全PneumaCult-ALI培养基；或(b)完全B-ALI培养基；(c)完全PneumaCult-ALI培养基和完全William's E培养基或(d)完全B-ALI培养基和完全William's E培养基。

5.一种共培养物，其包括根据前述权利要求中任一项所述的3维肝球状体和3维肺上皮细胞，优选地，

其中所述共培养物维持在包括以下或由以下组成或基本上由以下组成的细胞培养基中：(a)完全PneumaCult-ALI培养基；或(b)完全B-ALI培养基；或(c)完全PneumaCult-ALI培养基和完全William's E培养基或(d)完全B-ALI培养基和完全William's E培养基。

6.一种3维器官培养系统或一种3维多器官培养系统，所述3维器官培养系统包括根据权利要求1至4中任一项所述的分离的3维肝球状体，所述3维多器官培养系统包括根据权利要求1至4中任一项所述的分离的3维肝球状体并且进一步包括至少一种其它3维细胞类型，或包括根据权利要求5所述的共培养物，优选地，

其中所述3维肝球状体被浸没在所述培养系统上所含有的培养基中；和/或

进一步包括3维肺上皮细胞，适当地，其中所述3维肺上皮细胞在所述3维多器官培养系统上的空气液体界面处。

7.一种3维多器官培养系统，其包括：

(a)第一器官生长部分，其包括被调适成用于将第一3维细胞类型浸没在培养基中的第一器官腔；

(b)第二器官生长部分，其包括被调适成用于将第二3维细胞类型在空气液体界面处培养的第二器官腔，所述第二3维细胞类型是与所述第一3维细胞类型不同的细胞类型；以及

(c)将所述第一器官腔和所述第二器官腔连接以允许培养基在两者之间流动的培养基储集器；优选地，

其中所述第一器官腔和所述第二器官腔含有相同的培养基；和/或

其进一步包括根据权利要求5所述的共培养物；和/或

其中所述系统小型化；和/或

其中所述系统包括或是微流体装置，适当地，其中所述系统是芯片上器官。