[发明专利]新型异丙基苹果酸合酶变异体及使用其生产L-亮氨酸的方法有效
| 申请号： | 201780001521.0 | 申请日： | 2017-10-20 |
| 公开（公告）号： | CN108884449B | 公开（公告）日： | 2022-01-25 |
| 发明（设计）人： | 李智惠;宋秉哲;全爱智;金宗贤;金蕙园 | 申请（专利权）人： | CJ第一制糖株式会社 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/52;C12N15/77;C12P13/06 |
| 代理公司： | 北京市联德律师事务所 11361 | 代理人： | 黄大正;王璐 |
| 地址： | 韩国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 新型 丙基 苹果酸 合酶变 异体 使用 生产 亮氨酸 方法 | ||
1.一种具有异丙基苹果酸合酶活性的修饰多肽，其中由氨基酸序列SEQ ID NO：1组成的多肽的N端的558位的精氨酸被组氨酸、丙氨酸或谷氨酰胺置换。
2.一种具有异丙基苹果酸合酶活性的修饰多肽，其中由氨基酸序列SEQ ID NO：1组成的多肽的N端的561位的甘氨酸被精氨酸或酪氨酸置换。
3.根据权利要求1或2所述的修饰多肽，其中所述修饰多肽由选自由SEQ ID NO：21、22、23、25和26组成的组的氨基酸序列组成。
4.一种具有异丙基苹果酸合酶活性的修饰多肽，其中由氨基酸序列SEQ ID NO：1组成的多肽的N端的558位的精氨酸被组氨酸、丙氨酸或谷氨酰胺置换；并且由氨基酸序列SEQID NO：1组成的多肽的N端的561位的甘氨酸被天冬氨酸、精氨酸或酪氨酸置换。
5.根据权利要求4所述的修饰多肽，其中所述修饰多肽由选自由SEQ ID NO：27至35组成的组的氨基酸序列组成。
6.一种编码权利要求1至5中任一项所述的修饰多肽的多核苷酸。
7.根据权利要求6所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸由选自由SEQ ID NO：36至38和40至50组成的组的核苷酸序列组成。
8.一种生产L-亮氨酸的棒状杆菌属的微生物，其表达权利要求1至3中任一项所述的修饰多肽。
9.根据权利要求8所述的微生物，其中，所述棒状杆菌属的微生物是谷氨酸棒状杆菌。
10.一种生产L-亮氨酸的棒状杆菌属的微生物，其由包含编码权利要求1至5中任一项所述的修饰多肽的多核苷酸的载体转化。
11.一种生产L-亮氨酸的方法，包括：
(a)在培养基中培养根据权利要求8或10所述的生产L-亮氨酸的所述棒状杆菌属的所述微生物，以生产所述L-亮氨酸；和
(b)从所述培养的微生物或所述培养基中回收所述L-亮氨酸。
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