[实用新型]一种快速定量检测脂蛋白相关磷脂酶A2的化学发光免疫试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及生物技术诊断领域，具体涉及一种快速定量检测脂蛋白相关磷脂酶A2的化学发光免疫试剂盒。

背景技术

心脑血管疾病一直被公认为是危害人类健康的最大杀手之一，也是全球范围内造成死亡的最主要原因。心脑血管疾病的病理基础是动脉粥样硬化。近些年的研究表明，炎症反应在动脉粥样硬化的发生、发展过程中起着至关重要的作用，炎症反应与动脉粥样硬化息息相关。多种危险因素导致内皮功能紊乱是炎症的启动因子，而泡沫细胞形成的关键环节是脂质氧化，尤其是LDL 的氧化修饰，而OX-LDL诱导产生的各种细胞因子、炎症介质、生物酶、受体功能紊乱是导致炎症进一步加重发生的直接原因，对动脉粥样硬化炎症的认识促使我们去寻找潜在的炎症标志物，如今许多的炎症标志物已被我们发现，如 C 反应蛋白（CRP），白介素-6（IL-6），肿瘤坏死因子α（TNF-α）等。循环系统中的多种炎症标志物可能给冠心病的诊断提供重要的信息，也能够为冠脉事件风险的评估及冠心病的治疗提供更多的帮助。最近发现的炎症标志物脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2），又称血小板活化因子乙酰水解酶（PAF-AH），属于Ca2+离子依赖性磷脂酶 A2超家族，主要由单核细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞分泌。循环中80%的Lp-PLA2主要与带负电的、小而密的 LDL 结合，当循环中的 LDL-Lp-PLA2复合物进入血管内膜，在内膜上 LDL 被氧化，而 Lp-PLA2能够水解 LDL 上的卵磷脂氧化卵磷脂，生成溶血卵磷脂和氧化型游离脂肪酸（lysophosphatidylchoine,Lyso-PC and oxidized free fatty acids,ox-FFA），这两者都为促炎介质，能够聚集及激活单核细胞、淋巴细胞，诱导内皮细胞的凋亡，削弱坏死细胞的清除能力，能够促进动脉粥样硬化斑块的发展、脂质核心的坏死、斑块的不稳定，上述作用体现出了 Lp-PLA2明显的促炎及促细胞凋亡的作用，即起到了 LDL 致动脉粥样硬化及粥样斑块破裂的催化剂作用。国外4个较大的前瞻性研究发现 LP-PLA2水平与将来患冠心病的风险有着明显的独立相关性。然而由于炎症标志物较多，而且炎症标志物通常特异性不高且变异性较大，因此在运用到临床检测之前，确定任何检测物的生物学变异是一个关键点，若其稳定性好、特异性高、持续性强则是一个较好的指标。国外研究表明Lp-PLA2则具备上述的特点，其相比于其他的炎症标志物如有着较高的特异性以及较小的变异性，稳定性较好，可重复性高，是一个特异、可靠、稳定的炎症标志物。通过检测血液中的Lp-PLA2,可以有效的了解动脉粥样硬化斑块的炎症程度及其稳定性，可以预警心肌梗死和脑血栓的发生，对预防心脑血管突发事件具有相当重要的意义。

目前，检测Lp-PLA2的方法主要有酶联免疫法、胶乳免疫比浊法、胶体金法和免疫荧光法等。ELISA法存在灵敏度低、线性范围窄、不易实现全自动化等缺陷；胶乳增强免疫比浊法存在检测线性范围窄、阳性率低等缺点；而胶体金法也存在灵敏度弱、无法准确定量的缺陷，从而限制了推广使用，无法广泛地应用于临床诊断和科研工作。

此外，现有技术中的试剂盒的检测卡通常由上样垫、结合垫、具有检测线和质控线的承载膜及吸样垫组成，该种检测卡只适于血清样品，而血浆和全血样品不能来检测，必须经离心处理后方能检测，如此限制了试剂盒在家庭、养老院、条件简陋的社区卫生所等场合的应用。

发明内容

本实用新型所要解决的技术问题是提供一种快速定量检测脂蛋白相关磷脂酶A2的化学发光免疫试剂盒。

为解决以上技术问题，本实用新型采用如下技术方案：

一种快速定量检测脂蛋白相关磷脂酶A2的化学发光免疫试剂盒，试剂盒包括检测卡、发光启动试剂和化学发光免疫分析仪，检测卡包括上样垫、化学发光结合垫、具有检测线和质控线的承载膜、吸样垫、底板以及滤血膜，化学发光结合垫包括结合垫本体和涂覆在结合垫本体上的化学发光试剂标记抗体涂层，化学发光试剂标记抗体涂层中的抗体为脂蛋白相关磷脂酶A2的抗体，检测线为能够与脂蛋白相关磷脂酶A2的抗体特异性结合的配对抗体或抗原形成的涂层。

根据本实用新型的一个优选方面，滤血膜覆设在上样垫上，上样垫、化学发光结合垫、承载膜及吸样垫依次相互交错粘贴在底板上。

根据本实用新型的又一优选方面，检测卡还包括助推垫，滤血膜覆设在上样垫上，上样垫、化学发光结合垫、助推垫、承载膜及吸样垫依次相互交错粘贴在底板上。

优选地，助推垫的材质为玻璃纤维膜或无纺布。