[实用新型]一种核酸检测卡

说明书

本实用新型涉及核酸分析检测领域，特涉及一种核酸检测卡。本实用新型采样单元包括卡体、核酸收集试纸、加样孔和封口膜，加样孔设置在卡体上，核酸收集试纸卡在加样孔上，加样孔可被封口膜封闭；核酸收集试纸含有细胞裂解试剂，检测试剂条由样品垫、结合垫、NC膜和吸水垫依次设置组成，NC膜为C线、T线的承载体，吸水垫用于核酸检测反应后的冲洗，C线为对照线，T线为检测线，C线、T线上分别包被不同的核酸特异性抗体。本实用新型利用DNA本身严格的互补配对反应，极大降低了扩增成本，提高了扩增效率和自动化程度，适用于实验研究、临床检测、食品安全检测等领域。

技术领域

本实用新型涉及核酸分析检测领域，具体的说是一种基于核酸扩增反应和粘性末端介导的链置换反应的核酸检测装置及其使用方法。

背景技术

2003年SARS在中国大部分地区爆发，2005年禽流感的流行性传播以及2014年在非洲肆虐高致死率的埃博拉疫情，这一系列由病毒引起的传染病告诉我们在人类的发展史上一直受到病毒带来的致命性威胁。病毒的传播与变异大大超出了人类的预计，及时准确地诊断病毒对于提高患者存活率，控制疫情传播以及有效疾病治疗有着非常重大的意义。

常规的病原微生物检测方法是采用体外培养技术，但是，仅有约1％的细菌或病毒可以培养，以及培养过程的复杂性和漫长的培养时间，大大限制了这样技术的普及。随着分子生物学的发展，核酸检测被应用于病毒检测之中，不仅缩短了检测时间还提高了检测的灵敏度和特异性。核酸分子是所有病原体包括病毒在内的遗传载体，通过对特异性的核酸进行检测，可以判断样本中是否存在相应的病毒。聚合酶链式反应是最常见的核酸检测方法，该技术的出现使核酸水平的医学检测进入了一个全新的阶段。PCR技术通过在不同温度之间的循环实现DNA分子的复制，该技术需要对温度精确控制，因此依赖于精密的温控装置和专业的人员进行操作。在资源与人力相对匮乏的地区，PCR方法是难以用于病毒检测的。

为了克服对温控装置的依赖，一系列等温扩增方法应运而生，比如环介导等温扩增等。环介导等温扩增可以在60-65℃下对目标核酸进行扩增。等温扩增方法不仅可以是一种快速、灵敏、准确的核酸检测方式，同时对温控和检测设备要求简单，大幅降低了设备成本的投入。采用DNA荧光指示剂配合光学检测或者基于焦磷酸镁副产物的浊度检测，可对样品进行定量分析。

粘性末端介导的链置换反应是指两条完全互补或部分互补的DNA单链杂交后，置换掉一条或多条预杂交的DNA链的过程，该反应是一个动态竞争过程。此反应开始于目标DNA的悬垂末端即粘性末端。TSD依靠的是DNA本身严格的碱基互补配对性质，不需要核酸酶的参与即可发生。因此在DNA双链直接退火杂交的条件下，该反应即可通过互补的单链悬垂区域即粘性末端引发，然后经历一个分支迁移过程而完成。

在临床病例中，同一种病症可能由多种不同的病原体产生，造成医生诊断与对症开药的困难。采用核酸扩增方法，无论是PCR还是等温扩增，如何同时检测多种病原体或者目标基因一直是临床检测中的一个重大挑战。因此，发明一种操作简单、准确度高、灵敏度高的核酸检测产品，实现多种病原体或者目标基因的同时检测具有重要意义。

目前，精准医疗已成为全球现代医疗的研究热点和发展趋势，国际上有关精准医疗的研究和成果转化风起云涌。我国十三五计划提出大力发展精准医疗，使得在这一科技领域我国将有机会实现弯道超车，走在世界医疗科学技术的先进行列。精准医疗包括精准诊断和精准治疗，其中诊断是治疗的基础，而基于核酸检测技术的分子诊断则是精准诊断的核心。我国乃至国际上目前分子诊断市场主要基于各种大型仪器设备和冗长复杂的组织样品预处理手段，具有费用高、耗时长、目标不准确、普及性不高等缺点。本实用新型是基于微流控芯片技术的新型分子诊断芯片，较之前一代技术具有高通量、低成本、快速高效、灵敏度高、针对性强、普适性强等优点，具有十分广阔的应用潜力和市场前景。相比现有技术只能采取“全扫”的方式对诊疗对象的全基因组进行测序，造成大量资源的浪费和数据的无意义重复从而使得消费者群体对高昂的测序费用望而却步的现状。

实用新型内容