[实用新型]一种旋转式核酸检测卡盒

说明书

技术领域

本发明属于微生物检测领域，特别是现场致病微生物的检测，具体涉及一种旋转式核酸检测卡盒。本发明将磁珠法核酸提取技术和核酸检测技术（如LAMP浊度检测技术）相结合，在封闭卡盒内，实现了自动化核酸提取/纯化、扩增、检测过程。

背景技术

传统微生物培养法是将具有特异性的生化反应底物、抗体、荧光反应底物、酶反应底物等加入培养基中，对检测对象进行选择、分离、鉴定。其操作过程繁琐耗时，且有被感染的风险；不同的细菌需要不同的培养基，大多非可培养状态菌无法通过培养被检测；不同菌体可能产生相同的特异性物质，产生假阳性菌落。采用磁分离技术和LAMP技术的核酸检测方法，可以避免选择性增菌培养，减少了检测时间，且容易实现自动化。此外， LAMP与传统的核酸扩增方法相比具有如下优点：操作简单、高效快速，、高特异性、高灵敏度。当然LAMP缺点是容易污染、不方便产物回收及鉴定、设计空间较受限、扩增长度＜500 bp时不能进行长链扩增。

在疫区查找致病源需要将样本进行远程运输隔离后在实验室培养，这样需要花费几天的时间甚至更久，然而对于传染性强的病毒，会在非常短的时间里让大面积的人和动物感染，甚至死亡。为挽救生命，必须在现场几个小时内确定致病源。与此同时还要避免在取样、操作过程中出现的交叉污染导致的检测结果错误。传统的核酸检测需要使用多台仪器，如核酸提取仪、核酸扩增仪、荧光检测仪/凝胶电泳仪等检测设备。工作人员操作过程繁琐且容易感染，实验过程是开放的容易产生交叉污染，出现假阳性等缺点。

在农产品的前后期加工与流通中，容易造成食品的微生物污染。致微生物的检测是食源性疾病预防和控制的关键环节，对维护消费者的健康具有重要意义。食品安全事件具有突发性和紧迫性，食品污染源检测结果也需要有时效性，而现行使用的致病菌检测方法或设备具有操作复杂、耗时长等局限性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的旋转式核酸检测卡盒，将核酸检测所需试剂封存在卡盒内，在封闭卡盒内自动完成复杂的核酸提取、扩增和检测过程，不仅减少了繁琐耗时的手动/半自动核酸检测流程和工作人员的感染机会，而且能有效解决操作环境对试剂或样品的污染和生化反应对外界环境的气溶胶污染等；内置独特的移液/分液器；集成阳性和阴性对照组，确保检测的可靠性。

为了实现发明目的，一种旋转式核酸检测卡盒包括：移液器、垂直导杆、外壳、密封盖、底座、至少2个密封圈、至少2个弹簧等组成，外壳上具有至少3个定位孔、至少1个加样孔、至少1个外壳检测孔、至少1个底座检测孔。

所述移液器是可旋转的，位于卡盒内部，由注射推杆、弹簧1、定位孔2、空气置换腔体、可旋转移液臂、导气管、移液吸头、密封圈等组成。

所述定位孔2位于注射推杆上方，注射推杆和弹簧1位于空气置换腔体内，空气置换腔体与可旋转移液臂由导气管密封连接，移液吸头与可旋转移液臂密封连接。通过外部动力和弹簧1，驱动注射推杆往复运动，实现精确定量、定速的吸液和分液功能。

所述底座包含多个试剂室和外螺纹特征，试剂室中至少1个检测室，至少1个加热/制冷室，1个样本室，至少1个对照组。实验过程中所有试剂以液态或固态方式存储于试剂室中。检测室可以采用对射式、散射式、反射式等方式的光电检测。

所述底座的材料采用高透明、低试剂/样本吸附率、壁厚薄、不与任何化学试剂反应、具有生物兼容性的高分子聚合物。

所述旋转移液臂下面有十字定位孔。通过外部动力可以实现移液吸头精确旋转至每个试剂室上方。

所述定位孔1和定位孔3位于垂直导杆上方，垂直导杆与可旋转移液臂连接，弹簧2位于可旋转移液臂外部。通过外部动力和弹簧2，作用于垂直导杆，带动移液吸头精确定位到试剂室底部。

所述检测室与外壳检测孔和底座检测孔在统一中心轴上。

所述试剂室的中心与移液吸头垂直，置于移液吸头移动范围内。

所述底座与外壳通过螺纹旋转密封连接。

所述密封盖通过加样孔与外壳密封连接。

所述密封连接方式有密封圈、螺纹方式等。

所述外部动力可以是电机、气泵、液泵等各种提供扭矩、气压、液压动力的部件。并且由微处理器控制，在卡盒内部自动完成试验流程。

所述卡盒，通过可用吸头刺穿的铝膜，预先将核酸检测所需试剂封存。

本发明的一种旋转式核酸检测卡盒，将核酸检测所需试剂封存在卡盒内，在封闭卡盒内自动完成复杂的核酸提取、扩增和检测过程。具有以下优点。