[实用新型]快速定量检测呕吐毒素的荧光免疫层析试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型属于生物检测技术领域，具体涉及一种快速定量检测呕吐毒素的荧光免疫层析试剂盒。

背景技术

呕吐毒素主体成分为DON(deoxynivalenol,脱氧雪腐镰刀菌烯醇)，属于单端孢霉烯族化合物，主要由禾谷镰刀菌、尖孢镰刀菌、串珠镰刀菌、拟枝孢镰刀菌、粉红镰刀菌、雪腐镰刀菌等镰刀菌产生。另外，头孢菌属、漆班菌属、木霉属等的菌株都可产生该毒素。单端孢霉烯族毒素共有150多种，是一类强有力免疫抑制剂，所引起典型症状是采食量降低，所以这类毒素又叫饲料拒食毒素。呕吐毒素(DON)是其中最重要一种毒素，主要来自镰刀菌属(Fusarium)，尤其是禾谷镰刀菌(Fusariumgraminearum)和黄色镰刀菌(Fusarium culmorum)。由于它可以引起猪的呕吐，故又名呕吐毒素(vomitoxin，VT)。

呕吐毒素是食品中常见的真菌毒素，在自然界中广泛存在，通常在欧洲及北美发现的3种毒素是脱氧雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇和15-脱氧雪腐镰刀菌烯醇。由于它们具有很高的细胞毒素及免疫抑制性质，因此，对人类及动物的健康构成了威胁，特别是对免疫功能具有明显的影响。根据DON的剂量和暴露时间不同可引起免疫抑制或免疫刺激。当人摄入了被DON污染的食物后，会导致厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳、反应迟钝等急性中毒症状，严重时损害造血系统造成死亡。由于中国传统饮食习惯中粮谷比例大大高于西方，使得呕吐毒素的危害更为突出。1998年，在国际癌症研究机构公布的评价报告中，呕吐毒素被列为3类致癌物。我国谷物、猪配合饲料、犊牛配合饲料、泌乳期动物配合饲料中DON的限量标准为1.0mg/kg，牛配合饲料、家禽配合饲料中DON的限量标准为5.0mg/kg。

目前检测呕吐毒素的方法有多种，如薄层色谱法、酶联免疫吸附试验(ELISA)、气相色谱、高效液相色谱、红外光谱分析等。高效液色谱相属于国标法，灵敏度高、准确度高，但需要昂贵的仪器、样品的前处理复杂、花费时间长，检测成本高，不能现场操作，而且需专业人员操作，所以限制了其应用。酶联免疫吸附实验，对检测环境要求高，需要专业人员操作，适合大量样本的检测，并且有相应的数据处理。呕吐毒素的荧光定量检测试纸条配合相应的荧光读数仪，具有准确度高，重复性好，检测成本低，环境要求低，操作简单，便与数据的管理，保存和上传的特点。本产品适用于快速定量检测粮食谷物(大米、玉米、小麦、大麦、高粱等)及其制品、饲料及其原料中呕吐毒素的残留浓度，样品前处理简单，整个检测过程仅需18min左右(前处理8min+检测8min)，呕吐毒素荧光定量检测试纸条的CUT OFF值为1000ppb，灵敏度100ppb，添加回收率80％～125％，线性范围为100ppb～5000ppb，在10000ppb的浓度下与其他毒素无交叉反应。适用于各类粮食谷物加工企业、第三方检测机构及各级政府监管部门。

实用新型内容

本实用新型的目的是提供一种快速定量检测呕吐毒素的荧光免疫层析试剂盒，可快速、高效的检测呕吐毒素。

为实现上述目的，本实用新型所采用的技术方案是：包括盒体和盖体，盖体从盒体开口的一侧密封盒体，盖体上设有加样孔和观察窗，盖体的内壁滑动的设有密封件，密封件滑动过程中打开或封闭加样孔，盒体内设有免疫层析试纸条，所述免疫层析试纸条包括底板，底板上按照由一端至另一端的方向上顺序搭接有样品垫、结合垫、反应垫和吸水垫，结合垫上吸附有荧光微球标记呕吐毒素抗体和荧光微球标记鸡IgY，反应垫上设有检测区和质控区，检测区上包被有呕吐毒素抗原蛋白，质控区上包被有羊抗鸡IgY。

优选的，所述荧光微球为Eu³⁺标记的乳胶微球。

优选的，所述反应垫为聚酯纤维素膜。

优选的，所述盖体的内壁上设有滑槽，密封件的两侧嵌置于滑槽内。

优选的，所述密封件与一滑钮连接，盖体上设有长条孔，长条孔与滑槽平行，滑钮穿过长条孔并从盖体的顶面伸出。

优选的，所述盒体的底部设有定位件，所述免疫层析试纸条被定位件固定限位。

优选的，所述定位件为一卡环。

优选的，所述盒体和盖体的一端铰接，另一端通过扣接的方式使盒体与盖体闭合。

采用上述技术方案后，本实用新型具有以下积极效果：