[实用新型]一种植物组织快速直接PCR扩增试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型属于生物技术领域，涉及一种PCR扩增试剂盒，具体涉及一种植物组织快速直接PCR扩增试剂盒。

背景技术

随着越来越多植物基因组测序的完成，植物基因功能的研究越来越得到重视，基因研究的主要方法之一PCR也得到了长足的发展，植物基因组的PCR一直均以植物基因组DNA为扩增模板，因此在PCR的过程中第一步往往是植物基因组 DNA的提取。核酸提取纯化的原始目的是为了去除可能干扰后继反应的杂质，对于PCR技术来说，若是能跳过这一步，直接利用样本进行PCR，那不仅能省时省力，还能避免交叉污染的风险。由于DNA聚合酶性能的改进，已经使得Taq酶扩增性能越来越强大，实验室之间早已流传着各种直接用样品进行PCR的方法，不过大多只限于哺乳动物细胞或者细菌类，而甚少涉及植物细胞或组织，且扩增性能极不稳定，因此设计开发一种可用于植物组织快速直接PCR扩增试剂盒显得尤为重要。

实用新型内容

本实用新型要解决的技术问题为针对植物组织进行直接PCR扩增的问题，本实用新型能较好的应用于植物组织进行直接PCR扩增，体积小，操作简单、便于运输携带和使用。

为实现上述目的，本实用新型采用以下技术方案：

一种植物组织快速直接PCR扩增试剂盒,其包括盒体(1)、海绵衬垫(2)，所述的海绵衬垫(2)置于盒体(1)内，海绵衬垫(2)上设有容器孔并装有多个装有试剂的试剂管，分别为装有10xPCR Buffer的试剂管(3)、装有dNTPs 的试剂管(4)、装有MgCl₂的试剂管(5)、装有Taq酶的试剂管(6)。

所述的容器孔较佳的为4个，容器孔在所述的衬垫上分为两排排列，上述的装有10xPCR Buffer的试剂管、装有dNTPs的试剂管、装有MgCl₂的试剂管、装有Taq酶的试剂管的规格均为1.5ml。

上述的植物组织快速直接PCR扩增试剂盒试剂10xPCR Buffer主要包括KCl、 Tris-HCl,dNTPs主要包括dATP、dCTP、dGTP、dTTP，MgCl₂主要包括MgCl₂溶液， Taq酶为经过基因工程改造而成的高耐受性，可用于以植物组织为模板进行PCR 扩增的Taq酶和taq酶抗体混合物。

本实用新型的保存温度为-20℃，尽量减少反复冻融。

本实用新型较佳的使用方法为：

1.PCR反应液的配制；

2.PCR扩增反应；

3.PCR产物的检测。

优选地，所述的植物组织快速直接PCR扩增步骤包括：

1.PCR反应液的配制，将该发明试剂盒各组分进行水浴溶解并依据相应比例进行混合配制；

2.PCR扩增反应，将配制好的PCR反应液分装至0.2mlPCR扩增管中，加入模板(植物组织)并盖上管盖进行PCR扩增,扩增程序为95℃10min，9810s、 58℃30s、72℃60s/kb、40个循环，72℃5min,4℃保存。

3.PCR产物的检测，将PCR产物进行1.5％琼脂糖凝胶电泳进行检测。

应用本实用新型的有益效果为：本实用新型提供的一种植物组织快速直接PCR扩增试剂盒，通过使用优化设计的试剂及方法，有效克服了常规方法步骤繁琐，扩增效果差，无法以植物组织为模板进行扩增等问题。

本实用新型提供的植物组织快速直接PCR扩增试剂盒设计合理，内部结构及各试剂管排列有序，大小适宜，便于运输和使用。

附图说明

图1为本发明的植物组织快速直接PCR扩增试剂盒结构示意图。

具体实施方式

为了能够更清楚地描述本发明的技术内容，下面结合具体实施例来进行进一步的描述。

本发明所述的一种植物组织快速直接PCR扩增试剂盒，包括盒体(1)、海绵衬垫(2)，所述的海绵衬垫(2)置于盒体(1)内，海绵衬垫(2)上设有容器孔并装有多个装有试剂的试剂管，分别为装有10xPCR Buffer的试剂管(3)、装有dNTPs的试剂管(4)、装有MgCl₂的试剂管(5)、装有Taq酶的试剂管(6)。

所述的容器孔较佳的为4个，容器孔在所述的衬垫上分为两排排列，上述的装有10xPCR Buffer的试剂管、装有dNTPs的试剂管、装有MgCl₂的试剂管、装有Taq酶的试剂管的规格均为1.5ml。