[发明专利]一种高蛋白质水稻品系的染色体组鉴定方法

说明书

本申请公开了一种高蛋白质水稻品系的染色体组鉴定方法，包括以下步骤：A.取材；B.预处理；C.前低渗；D.固定；E.酶解；F.后低渗；G.二次固定；H.制片；I.染色体观察。A.取材：上午9点到10点，水稻田中剪取所需材料生长旺盛的根尖0.6‑0.9cm，用清水洗净。B.预处理：把饱和α‑溴萘放入管中，上下摇动，最后吸取下面的澄清作为最后的预处理液体，预处理2～4小时。本发明方法镜检时先在低倍体镜下观察，可见有丝分裂各时期的染色体，然后转换高倍镜观察。

技术领域

本发明涉及分子生物学遗传育种技术领域，特别涉及一种高蛋白质水 稻品系的染色体组鉴定方法。

背景技术

大米中各种营养素含量虽不是很高，但因人们食用量大，故其也具有 很高营养功效，是补充营养素的基础食物，是人类的主食之一，据现代营 养学分析，大米含有蛋白质，脂肪，维生素B1、A、E及多种矿物质，大 米中含碳水化合物75％左右，蛋白质7％-8％，脂肪1.3％-1.8％，并含有丰 富的B族维生素等。

粳米中的碳水化合物主要是淀粉，所含的蛋白质主要是米谷蛋白，其 次是米胶蛋白和球蛋白，其蛋白质的生物价和氨基酸的构成比例都比小麦、 大麦、小米、玉米等禾谷类作物高，消化率66.8％-83.1％，也是谷类蛋白 质中较高的一种，因此，食用大米有较高的营养价值。

水稻育种包含杂交稻育种和常规稻育种，育种目标从高产逐渐转向优 质，因蛋白质含量高低间接影响大米的营养高低，因此选育高蛋白含量的 水稻品种也是一个重要的研发方向；通过染色体组多倍化之后对同源多倍 体水稻和异源多倍体水稻进行更深入地研究则有可能解决产量问题和固 定稻属植物的杂种优势效应问题，由此将进一步完善稻属植物的科学研究 体系。

从物种倍性水平进化和染色体大小的适宜性的理论看，适当增大水稻 基因组，尤其是异源基因组，提高它的倍性水平，不仅将有可能大大提高 水稻产量，而且有可能大大增加它的遗传变异范围和可适应性，大幅度提 高水稻的质量和抗性，为水稻育种提供一个新途径。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于，提供一种高蛋白质含量的水稻新品 种选育方法，即通过在原有二倍体高蛋白含量水稻品种的基础上，通过进 行染色体加倍，从而选育出蛋白质含量较高的多倍体水稻品系。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种高蛋白质水稻品系的染色体 组鉴定方法，包括以下步骤：

A.取材；

B.预处理；

C.前低渗；

D.固定；

E.酶解；

F.后低渗；

G.二次固定；

H.制片；

I.染色体观察。

A.取材：上午9点到10点，水稻田中剪取所需材料生长旺盛的根尖 0.6-0.9cm，用清水洗净。

B.预处理：把饱和α-溴萘放入管中，上下摇动，最后吸取下面的澄清 作为最后的预处理液体，预处理2～4小时。

C.前低渗：将经过预处理的根尖用蒸馏水冲洗几次。

D.固定：把预处理好的根尖放入新鲜的甲醇∶冰乙酸＝3∶1固定液中， 然后放4℃冰箱保存。

E.酶解：从固定液中取出根尖放入无菌水中，把根尖上的固定液冲洗 干净，然后用刀片切取根尖前部0.3～0.7mm，用滤纸吸干上面的蒸馏水后 放入酶解液中，每个装有酶解液的管中放1-2个根尖，随后放进28℃的恒 温箱。

所述酶解液为2％纤维素酶+2％果胶酶，酶解时间为4.5-5h。