[发明专利]一种水稻种子的消毒方法

说明书

本申请公开了一种水稻种子消毒的方法，包括以下步骤：A.挑选粒大、饱满、表面无病斑的成熟水稻种子，手工去壳后进行烘干处理；B.对水稻种子进行消毒处理；C.将处理过的水稻种子分别进行接种，然后放入28℃恒温培养室内进行培养；D.每天观察种子的污染情况，10天后观察并记录种子的污染率和发芽率。本发明消毒方法，对细菌、真菌、芽胞、病毒均有效，不会给食用者内脏器官组织细胞造成受损。本发明消毒方法操作简单易行，杀菌效果理想且对种子的伤害小，其尾气经处理后，既不会伤害人体，也不会对环境造成影响。

技术领域

本发明涉及分子生物植物育种学技术领域，特别涉及一种水稻种子消毒的方法。

背景技术

植物组织培养是上世纪初开始，以植物生理学为基础发展起来的一项植物繁殖技术，主要是根据植物细胞具有全能性的理论，将植物的离体器官、组织、细胞置于无菌条件下，诱导出愈伤组织、不定芽、不定根，最后形成完整植株的过程。

随着科学技术的不断发展，研究领域的不断拓展与深入，植物组织培养技术的应用也越发的广泛。然而植物组织培养一些技术环节仍然存在不少问题，其中污染、褐化、玻璃化被认为是组织培养的三大杀手。与褐化、玻璃化相比，污染更易发生，给科研和生产实践带来巨大的危害。因此采取有效地防控措施，降低污染发生的机率，是组织培养成功的重要保障。在众多污染途径中，外植体污染是最常见且不易解决的问题。真菌污染和细菌污染是外植体污染的两种主要形式。其中，细菌污染是由各种细菌及内生菌引发的，潜伏期很长，有时继代几次后才表现出来。真菌污染易于发现，由霉菌和酵母菌引发，污染速度快，控制困难，一旦发生则损失较大(周俊辉等，2003)。

目前常用的外植体表面消毒剂有次氯酸盐、过氧化氢(双氧水)、溴水、硝酸盐、氯化汞(升汞)、抗菌素、酒精和异丙醇等。次氯酸盐主要有次氯酸钠和次氯酸钙(又名漂白粉)2种。但次氯酸钙在空气中易吸水潮解，影响灭菌效果，所以在外植体消毒中，次氯酸钠更为多见。该消毒剂高效广谱，但其杀菌效果并不理想，种子污染率高，不利于进行水稻种子尤其是珍贵种子的消毒处理。升汞是一种极为有效的杀菌剂，但其主要对细菌和真菌有效，对芽胞、病毒的效力差，甚至无效。此外，它也是一种剧毒药物，可造成内脏器官组织细胞受损。氯气价格低廉，消毒方法操作简单易行，杀菌效果理想且对种子的伤害小，其尾气经处理后，既不会伤害人体，也不会对环境造成影响。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于，提供了一种水稻种子的消毒方法，对细菌、真菌、芽胞、病毒均有效，不会给食用者内脏器官组织细胞造成受损。本发明消毒方法操作简单易行，杀菌效果理想且对种子的伤害小，其尾气经处理后，既不会伤害人体，也不会对环境造成影响。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种水稻种子消毒的方法，包括以下步骤：

A.挑选粒大、饱满、表面无病斑的成熟水稻种子，手工去壳后进行烘干处理；

B.对水稻种子进行消毒处理；

C.将处理过的水稻种子分别进行接种，然后放入28℃恒温培养室内进行培养；

D.每天观察种子的污染情况，10天后观察并记录种子的污染率和发芽率。

所述步骤B可以进一步包括：

①取烘干后的水稻种子，用75％无水乙醇浸泡消毒；

②将酒精倒出，用无菌水清洗3-4次；

③将无菌水倒出，加入浓度为6％的NaClO浸泡并摇床震荡消毒；

④用无菌水冲洗4-5次后，将种子平铺于无菌滤纸上干燥后，进行接种。

所述步骤B也可以进一步包括：

①取烘干后的水稻种子，用75％乙醇浸泡消毒；

②将75％乙醇倒出，用无菌水清洗3-4次；