[发明专利]一种用于生产丁位内酯的霉菌OMK-25及其应用

说明书

本发明公开了一种用于生产丁位内酯的霉菌OMK‑25及其应用，其保藏编号为CCTCC M 2017339，于2017年6月14日保藏于中国典型培养物保藏中心。本发明开发了一条由霉菌OMK‑25转化正烷酸或其酯生成对应的5‑羟基烷酸或其酯，再经后处理生成丁位内酯的路线，该正烷酸或其酯包括C6～C18的烷酸或其酯，工艺简单，收率较高，与其他丁位内酯方法不同，可以工业化生产，所得产物的对映体过量值(ee)为95％‑100％。

技术领域

本发明属于微生物发酵生产技术领域，具体涉及一种用于生产丁位内酯的霉菌OMK-25及其应用。

背景技术

丁位内酯(delta内酯)是用于食用香精，用作高档食用香料、日用香精和其它功能添加剂。在崇尚天然产品的时代，人们研究了丁位内酯多种生产方法。从最开始的植物提取法，如玛索亚油来源的玛索亚内酯，到现在的生物发酵法，生物转化法和酯酶催化等，如利用微生物代谢亚油酸产生丁位癸内酯，酯酶水解脂肪酸生成丁位癸内酯，酵母菌等催化不饱和内酯生成饱和内酯等各种工艺。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于生产丁位内酯的霉菌OMK-25。

本发明的另一目的在于提供一种丁位内酯的生产方法。

本发明的技术方案如下：

一种霉菌OMK-25(Mucor.sp OMK-25)，其保藏编号为CCTCC M 2017339，于2017年6月14日保藏于中国典型培养物保藏中心(保藏地点为湖北省武汉市，武汉大学)。

本发明的另一技术方案如下：

上述霉菌OMK-25在生产丁位内酯中的应用。

本发明的再一技术方案如下：

一种丁位内酯的生产方法，其特征在于：以正烷酸或正烷酸酯为底物，经上述霉菌OMK-25进行发酵生产。

在本发明的一个优选实施方案中，包括如下步骤：

(1)菌种活化：将霉菌OMK-25接种于固体斜面培养基上，于28～30℃培养2～5d；上述固体斜面培养基中含有：可溶性淀粉1.5～3.0％，磷酸氢二钾0.1～1.0％，氯化钠0.05～0.3％，酵母抽提物0.1～1.0％，胰蛋白胨0.1～1.0％；

(2)种子培养：将步骤(1)所得的培养物接种至种子培养基中，于28～35℃及150～500rpm的条件下培养至对数生长期；上述种子培养基的初始pH为7.0～7.5，其中含有：可溶性淀粉2.0～3.5％，磷酸氢二钾0.1～0.5％，碳酸钙0.1～0.3％，酵母浸粉0.1～1.0％；

(3)发酵培养：将步骤(2)所得的培养物以8～12％的体积比接种至发酵培养基，于30～40℃及200～500rpm的条件下培养至发酵培养基中的葡萄糖消耗完毕后，添加所述正烷酸或正烷酸酯至终浓度为8～22g/L，并调节pH为7.0～7.5，继续发酵65～100h，生成含有5-羟基烷酸或其酯的发酵液；上述发酵培养基的初始pH为7.2～7.6，其中含有：葡萄糖2.0～5.0％，磷酸氢二钾0.1～0.3％，硫酸镁0.05～0.1％，碳酸钙0.5～2.0％，酵母浸粉0.1～1.0％，硫酸铵0.1～0.5％；

(4)对步骤(3)所得的发酵液进行后处理，得到含有相应丁位内酯的发酵液。

进一步优选的，所述步骤(3)中：将步骤(2)所得的培养物以10％的体积比接种至发酵培养基。

进一步优选的，所述发酵培养基的初始pH为7.5。

进一步优选的，所述步骤(3)中：一次性或分批添加所述正烷酸或正烷酸酯至终浓度为10～20g/L。