[发明专利]一种猪肠道损伤的检测试剂盒及检测方法

说明书

本发明公开一种猪肠道损伤的检测试剂盒及检测方法，所述猪肠道损伤的检测试剂盒包括猪二胺氧化酶与瓜氨酸抗体包被的微孔板、HRP标记的二胺氧化酶与瓜氨酸抗体、TMB底物溶液、猪肠道损伤阳性标准血浆和阴性标准血浆。本发明旨在提供一种操作简单、专业水平要求不高、成本低，能迅速、安全、稳定、可靠地检测及评价肠道损伤的方法。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种猪肠道损伤的检测试剂盒及检测方法。

背景技术

二胺氧化酶是人类和哺乳动物小肠粘膜上层绒毛中具有高度活性的细胞内酶，在组胺和多种多胺代谢中起作用，其活性与粘膜细胞的核酸和蛋白合成密切相关，能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。二胺氧化酶在分裂细胞中高度表达。在肠粘膜细胞坏死脱落入肠腔，使肠粘膜二胺氧化酶活性降低，肠内容物二胺氧化酶活性升高；二胺氧化酶进入肠细胞间隙，使血浆中二胺氧化酶活性升高，血浆二胺氧化酶活性的变化，可在无创情况下反映肠道损伤和修复情况，因此，它将作为观测肠道功能损伤的重要指标。

瓜氨酸是一种α-氨基酸，是从鸟氨酸及胺基甲酰磷酸盐在尿素循环中生成，或是通过一氧化氮合酶(NOS)催化精氨酸生成NO的副产物。瓜氨酸常被应用在短肠综合征、肠移植排斥反应的相关研究中。短肠综合征患者肠道长度减少、吸收面积降低，检测血瓜氨酸水平提示对比正常人群水平明显降低，且与D-木糖吸收水平、残存肠道面积、长度呈显著正相关性。由于肠道中有效地吸收面积易直接干扰营养物质吸收，两者存在显著相关，血瓜氨酸水平可准确描述和预测短肠综合征中肠道吸收、尚存面积，可作为短肠患者中肠障碍程度的良好指标。因此，瓜氨酸也可作为肠道损伤的标志物。

现有技术中尽管已有通过肠道解剖临床症状及黏膜形态结构显微观察，及基因、蛋白质表达量等分子生物学检测分析的方法来评价肠道损伤情况，但现有的检测分析方法操作繁琐、过程复杂、专业水平要求过高、耗时费力成本高，很难实现迅速、安全、稳定、可靠地检测及评价肠道损伤情况。

发明内容

本发明的主要目的是提出一种猪肠道损伤的检测试剂盒及检测方法，旨在提供一种操作简单、专业水平要求不高、成本低，能迅速、安全、稳定、可靠地检测及评价肠道损伤的方法。

为实现上述目的，本发明提出一种猪肠道损伤的检测试剂盒，所述猪肠道损伤的检测试剂盒包括猪二胺氧化酶与瓜氨酸抗体包被的微孔板、HRP标记的二胺氧化酶与瓜氨酸抗体、TMB底物溶液、猪肠道损伤阳性标准血浆和阴性标准血浆。

为实现上述目的，本发明提出一种猪肠道损伤的检测方法，所述检测试剂盒包括上述的猪肠道损伤的检测试剂盒，所述检测试剂盒包括猪二胺氧化酶与瓜氨酸抗体包被的微孔板、HRP标记的二胺氧化酶与瓜氨酸抗体、TMB底物溶液、猪肠道损伤阳性标准血浆和阴性标准血浆；

所述猪肠道损伤的检测方法包括如下步骤：

从待测仔猪的前腔静脉采血并分离血清，将所述血清作为待测样品；

将所述检测试剂盒加入所述待测样品中，测定所述待测样品中的二胺氧化酶以及瓜氨酸；

根据所述待测样品中的二胺氧化酶以及瓜氨酸的检测结果，判定猪肠道是否损伤。

优选的，所述将所述检测试剂盒加入所述待测样品中，测定所述待测样品中的二胺氧化酶以及瓜氨酸的步骤，具体包括：

将待测样品分成两份；

将检测试剂盒加入第一份所述待测样品中，测定所述待测样品中的二胺氧化酶；

将检测试剂盒加入第二份所述待测样品中，测定所述待测样品中的瓜氨酸。

优选的，所述将检测试剂盒加入第一份所述待测样品中，测定所述待测样品中的二胺氧化酶，具体包括如下步骤：