[发明专利]一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法

说明书

本发明涉及一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的反相色谱柱，流动相A为含有磺酸钠盐的pH为3.0～6.0的磷酸缓冲水溶液，流动相B为乙腈，流动相A:流动相B＝90:10～80:20，采用紫外检测器检测，检测波长为205～215nm，所述的磺酸钠盐选自庚烷磺酸钠、己烷磺酸钠和辛烷磺酸钠中的一种。本发明方法具有快速简便、灵敏度高、准确可靠的优点，适用于分离检测苯丙氨酸的有关物质。

技术领域

本发明属于一种氨基酸有关物质的分析领域，具体涉及一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法。

背景技术

氨基酸作为蛋白质的基本组成单位,为促进生长,进行正常代谢,维持生命活动提供重要的物质基础。而处于疾病状态下的人群,对于氨基酸更是有着特殊的需要,不仅需要从食物中摄取氨基酸,还需要通过静脉给予氨基酸来满足机体的需要甚至达到治疗疾病的目的。

随着药品研发水平的提升以及由氨基酸制剂引起的不良反应时有发生，对氨基酸杂质的研究引起了国内审评专家和业内专业人员的广泛关注。但前几年行业内均认为氨基酸为营养类物质，其杂质也是其它氨基酸，不存在安全风险，故并没有人研究氨基酸类的杂质。结合各国药典，也只有欧洲药典和美国药典对色氨酸杂质进行控制，其余所有氨基酸均不控制有关物质。

本发明开发了一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法，具有专属性好，重复性好，灵敏度高的优点。

发明内容

本申请的发明人开发了一种苯丙氨酸的有关物质分析检测方法。该方法专属性好，重复性好，灵敏度高，可用于苯丙氨酸的有关物质的控制。

一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的反相色谱柱，流动相A为含有磺酸钠盐的pH为3.0～6.0的磷酸缓冲水溶液，流动相B为乙腈，流动相A:流动相B＝90:10～80:20，采用紫外检测器检测，检测波长为205～215nm，所述的磺酸钠盐选自庚烷磺酸钠、己烷磺酸钠和辛烷磺酸钠。

所述一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于，流动相A:流动相B＝90:10。

所述一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于，流动相A中磺酸钠盐的浓度为5mmol/L～15mmol/L，磷酸根的浓度为10mmol/L～30mmol/L。

所述一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于，流动相A中磺酸钠盐的浓度为10mmol/L，磷酸根的浓度为20mmol/L。

所述一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于所述的磺酸钠盐为庚烷磺酸钠。

所述一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于所述的磷酸缓冲水溶液为磷酸氢二钠-磷酸缓冲溶液。

所述一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于流动相A的pH为5.0。

所述一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于，柱温为30～40 ℃。

所述一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于，柱温为35℃。

所述一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于，流速为 0.7～1.2mL/min。

所述一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于，流速为1.0mL/min。

所述一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于，进样量为15-25ul。

所述一种苯丙氨酸有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于，进样量为20ul。