[发明专利]裂殖壶菌及其产纤维素酶的应用有效
| 申请号： | 201711493956.X | 申请日： | 2017-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN108220170B | 公开（公告）日： | 2020-05-26 |
| 发明（设计）人： | 于欣君;汪钊;陈虹 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12N1/14 | 分类号： | C12N1/14;C12N9/42;C12R1/645 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;李世玉 |
| 地址： | 310014 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 裂殖壶菌 及其 纤维素酶 应用 | ||
1.裂殖壶菌(Aurantiochytrium sp.)WZYU059，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO:M 2016620，保藏日期为：2016年11月7日，保藏地址为中国武汉，武汉大学，邮编430072。
2.一种利用权利要求1所述裂殖壶菌WZYU059生产纤维素酶的方法，其特征在于所述方法为：将裂殖壶菌WZYU059接种至发酵培养基中，在25-35℃下，50-600rpm振荡培养，得到发酵液，将发酵液离心，弃细胞沉淀，得到含纤维素酶的粗酶液，将粗酶液分离纯化，获得纤维素酶；所述发酵培养基组成为：葡萄糖20-120g/L，酵母粉10-80g/L，蛋白胨0-40g/L，海盐20g/L，溶剂为水，pH值自然。
3.如权利要求2所述利用裂殖壶菌WZYU059生产纤维素酶的方法，其特征在于所述裂殖壶菌WZYU059接种前先进行斜面活化和种子扩大培养：(1)斜面活化：将裂殖壶菌WZYU059接种于斜面培养基，28-30℃下培养2-3天，获得斜面菌体；所述斜面培养基组成为：葡萄糖10-40g/L，酵母粉10g/L，蛋白胨5g/L，海盐20g/L，琼脂20g/L，溶剂为水，pH值自然；(2)种子培养：将斜面菌体接入含100mL种子培养基的500mL三角瓶中，在28-30℃下，180rpm震荡培养1-2天，得到种子液；所述种子培养基组成为：葡萄糖60g/L，酵母粉10g/L，蛋白胨5g/L，海盐20g/L，溶剂为水，pH值自然。
4.如权利要求3所述利用裂殖壶菌WZYU059生产纤维素酶的方法，其特征在于所述发酵液按如下方法制备：将种子液接入含发酵培养基的发酵罐中，在25-35℃下，转速50-600rpm，通气量10-200L/min，溶氧量10-60％的条件下，培养时间1-6天，获得发酵液。
5.如权利要求3所述利用裂殖壶菌WZYU059生产纤维素酶的方法，其特征在于所述种子液以体积浓度的1％-20％的接种量接种至发酵培养基。
6.如权利要求4所述利用裂殖壶菌WZYU059生产纤维素酶的方法，其特征在于发酵培养条件为：28-32℃，转速100-300rpm，通气量50-80L/min，溶氧量20-50％，培养时间4-6天。
7.如权利要求2所述利用裂殖壶菌WZYU059生产纤维素酶的方法，其特征在于所述发酵液离心条件为：8000rpm，4℃下离心5min。
8.如权利要求2所述利用裂殖壶菌WZYU059生产纤维素酶的方法，其特征在于所述发酵培养基组成为：葡萄糖100g/L，酵母粉20g/L，蛋白胨10g/L，海盐20g/L，溶剂为水，pH值自然。
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