[发明专利]一种他卡西醇的异构体杂质PY2及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种他卡西醇的异构体杂质PY2，即(1α,3β,5Z,7E,24S)-9,10-开环胆甾-5,7,10(19)-三烯-1,3,24-三醇，其结构如式1化合物所示，

。

2.根据权利要求1所述的杂质，其特征在于，其高效液相纯度为大于等于98.5%，优选为大于等于99.0%，更加优选为大于等于99.5%；该杂质的用途是用于他卡西醇的有关物质对照品，或者用于他卡西醇的杂质鉴定。

3.权利要求1或2所述的杂质作为杂质对照品，在他卡西醇原料药和制剂的质量控制中的用途。

4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，其采用的杂质分析方法为高效液相色谱法，其计算方法选自外标法，加校正因子的自身对照法，不加校正因子的自身对照法，峰面积归一化法中的一种。

5.一种制备如权利要求1或2所述杂质的方法，其特征在于，包含如下步骤：

（1） 将式6化合物中加入二氯甲烷、咪唑，搅拌溶解后，控温0-5℃, 滴加叔丁基二甲基氯硅烷；滴加完毕后升至室温反应2h，TLC监控至原料反应完全，水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，得深棕色油状物，即式7化合物；

（2）将式7化合物溶于二氯甲烷中，降温，-20~-10℃向反应液中通入二氧化硫气体，通毕，升温至-15~-10℃下控温搅拌反应1 h，TLC监测反应完全，脱除溶剂得黄色油状物，即式8化合物；

（3）将式8化合物溶于等体积的二氯甲烷和四氢呋喃混合溶剂中，降温至-65~-80℃后通入臭氧，搅拌反应6~8 h，TLC监测反应完全后加入三苯基膦，室温搅拌0.5h，将反应液依次用5%碳酸氢钠溶液、水、饱和盐水各洗涤一次，无水硫酸钠干燥，滤液浓缩至干得到黄色固体，即式9化合物；

（4）将式9化合物溶于95%乙醇，加入碳酸氢钠，搅拌升温至75～85℃下反应1~2 h，TLC监测反应完全，加入乙酸乙酯和纯化水溶解分液，有机相依次用水、饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠，滤液浓缩至干得到棕红色固体，即式10化合物；

（5）将式10化合物与3-甲基-1-(三苯基亚甲基膦)- 2-丁酮，加入到甲苯中，110~115℃下回流反应30 ~35 h，TLC监测反应完全，冷至室温，浓缩至干后柱层析纯化，得到浅黄色油状物，即式11化合物；

（6）将式11化合物、碳酸氢钠、连二硫酸钠、十六烷基三甲基氯化铵加入到甲苯和纯化水中，加热至60~65℃下，反应1~1.5 h，TLC监测反应完全，冷至室温，后加入乙酸乙酯和纯化水分液，有机层依次用水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，滤液浓缩至干得到浅黄色油状物，即式12化合物；

（7）将式12化合物溶于四氢呋喃中，加入(1R,2S)-(+)-1-氨基-2-茚醇，氮气保护下，降温至0℃以下，滴加三仲丁基硼氢化钾的四氢呋喃溶液，滴毕，在-5~0℃搅拌1 h， TLC监测反应完全后加入冰水淬灭，后加入乙酸乙酯和纯化水分液，有机相用饱和盐水洗一次，无水硫酸钠干燥，滤液浓缩至干柱层析纯化，得到浅黄色油状物，即式13化合物；

（8）将式13化合物、9-乙酰基蒽、吡啶和甲苯，加入到光化学反应器中，在氮气保护下进行光照反应，TLC监测反应完全，脱除溶剂，得到浅黄色油状物，即式14化合物；

（9）将式14化合物溶于四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液中，50-55℃反应2h，TLC监测反应完全，脱除溶剂，剩余物中加入乙酸乙酯和水分液，有机相用饱和食盐水洗涤，干燥后浓缩至干，剩余物中加入马来酸酐和乙酸乙酯，30-35℃下搅拌反应24h，浓缩至干后柱层析得到高纯度的白色固体，即式1化合物。