[发明专利]一种澳洲鸽石斛优质种苗无性克隆快速繁殖方法

说明书

本发明公开了一种澳洲鸽石斛优质种苗无性克隆快速繁殖方法。本发明以澳洲鸽石斛当年新萌发生长的嫩芽为外植体，经过类原球茎诱导培养、类原球茎增殖培养、类原球茎分化培养、生根壮苗培养和出瓶移栽，实现澳洲鸽石斛优质种苗的快速繁殖。本发明的方法具有可定时、定质、定量提供规格划一整齐一致的优质澳洲鸽石斛试管苗满足市场需求，试管苗无病虫生长健壮，种苗具有品质好、抗性强、生长迅速、便于生产管理和降低生产成本等优势。可为国内发展澳洲鸽石斛产业提供大量优质标准的种苗，对促进澳洲鸽石斛产业在我国的发展，尽早形成规模化生产，抢先进入全国花卉市场，具有积极的推动作用。

技术领域：

本发明属于植物繁殖技术领域，具体涉及一种澳洲鸽石斛优质种苗无性克隆快速繁殖方法。

背景技术：

澳洲鸽石斛组(Section Dendrocryne)，是兰科石斛属(Dendrobium)41个组中的一个组，约有12个原种，主要原产于澳大利亚东部、豪勋爵岛(Howe Island)和新加勒多尼亚岛(New Caledonia Island)，常见原种有Den.fleckeri、Den.gracilicaule、Den.jonesii、D en.kingianum、Den.speciosum及其各变种、Den.tetragonum及其各变种与变型。本组中的原种大多具有开花性极佳、花图锦簇、香味浓厚、非常热闹特点。早在19世纪，人们就开始利用Dendrocryne开展了杂交育种，至今已选育出许多品种，仅利用Den.kingianum作母本就选育出了58个品种(英国皇家园艺学会中数据库)，作父本选育出了103个品种。在这些新选育的品种中部分品种开花期延长了许多，使Dendrocryne的观赏性进一步加强，这使得该组的很多种类具有极大的园林园艺开发潜力和商业价值。

澳洲鸽石斛花色彩绚丽、花开热闹、花香馥郁、栽培容易且生长快速，其正常的生长温度可低至1.7℃(最低不可低于-1.7℃)。华南地区的气候条件非常适宜澳洲鸽石斛的生产。澳洲鸽石斛传统繁殖方法是分株繁殖，繁殖速度慢，周期长且种苗大小不一致，难以满足市场需求。本发明通过组织培养保持种苗的品种性状，在较短时间内繁殖出大量的种苗，种苗标准一致，出苗时间可控制，满足生产要求，是提高澳洲石斛种苗繁育效率及种苗标准化的有效途径。经文献查询，国内还没有澳洲鸽石斛组培快繁技术研究的报道，本发明可填补国内空白，为国内发展澳洲鸽石斛产业提供大量优质标准的种苗，对促进澳洲鸽石斛产业在我国的发展，尽早形成规模化生产，抢先进入全国花卉市场，具有积极的推动作用。

发明内容：

本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种澳洲鸽石斛优质种苗无性克隆快速繁殖方法。

本发明的澳洲鸽石斛优质种苗无性克隆快速繁殖方法，包括以下步骤：

a、外植体的消毒：选取澳洲鸽石斛优良单株当年新萌发生长的嫩芽为外植体，去除叶片并将其切成包含芽点的小段后进行消毒处理，剥去苞叶后再进行消毒处理，得到消毒后的嫩芽；

b、类原球茎诱导培养：切取消毒后的嫩芽上带节的茎段和顶芽，接种到类原球茎诱导培养基SB1，培养温度为(25±2)℃，光照度1500～2000lx，光照时间12h/d，待茎段节位和顶芽基部节位有腋芽产生、外植体基部切口膨大形成颗粒突起时转接到新的类原球茎诱导培养基SB1，培养温度为(25±2)℃，光照度1500～2000lx，光照时间12h/d，获得类原球茎；

所述的类原球茎诱导培养基SB1：每升含花宝1号1～2g、花宝2号1～2g、硫酸亚铁20～40mg、乙二胺四乙酸二钠20～40mg、蛋白胨0.5～2g、椰子汁50～100mL、肌醇80～120mg、甘氨酸1.5～2.5mg、盐酸硫胺素0.05～0.2mg、盐酸吡哆醇0.4～0.8mg、烟酸0.4～0.8mg、6-苄基嘌呤5.0～8.0mg、萘乙酸0.2～2mg、蔗糖15～30g和琼脂6～7g，pH 5.4-5.6；