[发明专利]一种超声辅助复合酶法提取蕨菜中总黄酮的方法

说明书

本发明涉及中药有效成分提取领域，公开了一种超声辅助复合酶法提取蕨菜中总黄酮的方法，包括如下步骤：(1)新鲜蕨菜杀青、烘干、粉碎，过筛后得干粉；(2)蕨菜干粉放入三角烧瓶中，按比例加入乙醇，超声功率280‑320W条件下提取15‑25min，提取2‑4次，每次间隔14‑16min；(3)冷却至室温，加入复合酶，再于50‑55℃条件下浸提110‑120min，过滤，收集滤液；(4)减压浓缩至浆状，冷冻干燥；(5)聚酰胺柱纯化、冷冻干燥。本发明的优点在于：采用超声辅助复合酶法提取技术，提取的蕨菜中黄酮含量9.0‑9.2％，芦丁含量0.95‑1.2％，紫云英苷含量0.80‑0.90％。

技术领域

本发明涉及中药有效成分提取领域，尤其涉及一种超声辅助复合酶法提取蕨菜中总黄酮的方法。

背景技术

尿酸是人类嘌呤代谢的终末产物，由次黄嘌呤、黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶(XO)的作用下生成。由于人体内缺乏尿酸氧化酶，不能将其进一步分解成可溶性的尿囊素，而使人类极易形成高尿酸血症。任何原因引起尿酸生成增多和(或)排泄减少均可导致高尿酸血症。通常高尿酸血症被认为是痛风的标志，据统计约有5％-12％的高尿酸血症最终可发展为痛风。近年的研究表明，高尿酸血症不仅是痛风最重要的生化基础，而且与高血压、高脂血症、动脉粥样硬化、肥胖、胰岛素抵抗的发生密切相关，已成为威胁人类健康的严重代谢性疾病。

目前治疗高尿酸血症的药物非常有限，主要依赖于XO抑制剂别嘌醇和促尿酸排泄药丙磺舒、苯溴马隆、非布司他和培格洛替酶等，但这些药物毒副作用大，患者常常不能耐受，在一定程度上限制了其使用。因此，本实验课题组前期研制出了一种以蕨菜黄酮作为唯一活性成分的抗高尿酸血症药物(申请号为201410089031.9的专利申请)，并公开了相应的蕨菜黄酮的提取方法“将新鲜蕨菜在温度103℃条件下烘干，研成蕨菜粉末；用乙醚对蕨菜粉末进行脱脂，得到蕨菜干粉，加入3-5倍质量的体积分数为70-90％乙醇，回流提取1-3小时，提取3-5次，合并滤液，减压浓缩干燥得褐色蕨菜黄酮提取物，即蕨菜黄酮”。然而，该提取方法时间长，耗能多，且蕨菜黄酮的提取率仅有7％左右，还尚待进一步改进。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种提取时间短、耗能少，且蕨菜黄酮提取率高的超声辅助复合酶法提取蕨菜中总黄酮的方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：一种超声辅助复合酶法提取蕨菜中总黄酮的方法，包括如下步骤：

(1)采取新鲜的蕨菜幼嫩叶及叶柄杀青、烘干、粉碎，过筛后得蕨菜干粉；

(2)将蕨菜干粉放入三角烧瓶中，再按1:(15-20)比例加入浓度为70-75％乙醇，在超声功率280-320W的条件下提取15-25min，提取2-4次，每次间隔14-16min；

(3)冷却至室温，向其加入1.3-1.8％复合酶，再于50-55℃温度条件下浸提110-120min，过滤，收集滤液，得蕨菜黄酮提取液；

(4)减压浓缩至浆状，冷冻干燥，得粗蕨菜黄酮干粉；

(5)聚酰胺柱纯化、冷冻干燥，得精制蕨菜黄酮干粉。

作为本发明的优选方式之一，所述步骤(1)中过筛为35-45目筛。

作为本发明的优选方式之一，所述步骤(3)中复合酶具体为含纤维素酶和果胶酶的复合酶。

作为本发明的优选方式之一，所述复合酶中纤维素酶和果胶酶的重量比为(1-3)：1。

作为本发明的优选方式之一，所述步骤(4)中蕨菜黄酮提取液于旋转蒸发瓶中35-40℃温度条件下进行减压浓缩。

作为本发明的优选方式之一，所述步骤(5)中精制蕨菜黄酮干粉中含黄酮类物质大于60％，蕨菜黄酮提取率9.0-9.2％。