[发明专利]一种促发木本植物成年树萌发幼态芽的方法及基于幼态芽的快速繁殖种苗的方法

说明书

本发明公开了一种促发木本植物成年树萌发幼态芽的方法及基于幼态芽的快速繁殖种苗的方法。本发明将剥皮伤害处理结合吊瓶输液方法来促发木本植物成年树萌发幼态芽以利于其较容易完成其组织培养快速繁殖种苗的技术，综合利用伤害刺激和细胞分裂素对木本植物成年树促发幼态萌芽作用，为性状优良的成年树优选单株的组织培养快速繁殖种苗提供足够的外植体材料，从而高效地通过组织培养快速生产出优质的种苗，解决通常取的生理年龄较大的嫩芽为外植体时而导致的增殖和生根率不高的问题。采取该幼态芽为外植体，较易有效完成其增殖、生根过程，增殖和生根效果更好，十分利于木本植物成年树优秀单株的组织培养快速繁殖种苗，应用前景广阔。

技术领域：

本发明属于植物生物技术领域，具体涉及一种促发木本植物成年树萌发幼态芽的方法及基于幼态芽的快速繁殖种苗的方法。

背景技术：

植物组织培养已广泛应用于农业生产中的多个领域，已经在种苗脱毒生产、种苗快速繁殖、植物新资源的规模化应用、植物新品种选育等方面给现代农业产生了深远的影响，是农业生物技术在现代农业应用上的典范，是现代种业的重要组成部分。目前，我国植物组培苗已经在花卉、果树、阴生植物、药用植物等取得了大面积的推广与应用，全世界植物组培苗的年贸易额已超过150亿美元，并且，每年以超过10％的速度在递增。利用基于离体培养技术的植物种苗组培快繁方法来生产种苗，比常规繁殖方法快万倍乃至十万倍以上，一个植株一年可以繁育几万到几百万个植株。利用组培快繁技术来繁殖种苗的成本非常低廉，比用常规的种苗生产方法生产成本低10倍以上。并且，对一些营养繁殖系数低且不能通过种子繁殖的农业植物(如香蕉等)、或在自然条件下种子难以萌发的植物(如铁皮石斛等)、或数量稀少的优良材料(如生产过程中发现的某些优良变异单株等)而言，如果没有组培快繁技术，要想实现其规模化产业化生产是非常困难的，对一些通过种子来繁殖时农艺性状会出现分离的作物(如番木瓜等)而言，如果没有种苗的组培脱毒快繁技术，要想进一步提高其生产效益也是非常困难的。正是基于种苗组培快繁技术在繁殖速度高和成本低廉等方面的优势，植物种苗组培快繁目前已在农业领域发展成了一个巨大的产业，并取得了巨大的社会经济效益。我省的种苗组培快繁产业年产值和技术在全国处于领先地位，目前我省涉及到利用组培快繁来生产种苗的农业植物有300多种，估计组培产业年产值在10亿元以上。

目前在国内的植物组培苗生产中能够成功进行大规模种苗生产的木本植物的种类比例远低于草本植物种类，从已有的报道当中公认木本植物组织培养难度比草本植物高很多，这也是能够进行商品化生产种苗的木本植物种类较少的原因。经过我们多年的研究发现，木本植物一般都是多年生，虽然采集的外植体是当年生的嫩芽，但其生理年龄已经比较大，而以此为外植体进行其组织培养快速繁殖种苗时，其增殖倍率和生根率往往比较低，难以将技术应用于商品化生产；相反如果能够从成年树中获取生理年龄低的幼嫩的萌芽，其组织培养难度大幅度降低，组织培养过程中的增殖倍率和生根率都比较高，其组织培养技术能应用于规模化种苗生产。

目前，国内已有木本植物成年树优良单株的组织培养快速繁殖种苗的报道，但未见促发木本植物成年树优良单株萌发幼态芽以较容易建立其组织培养技术体系的报道。

发明内容：

本发明的目的是针对木本植物组织培养难度大的问题，提出一种促发木本植物成年树萌发幼态芽的方法及基于幼态芽的快速繁殖种苗的方法。本发明通过剥皮伤害结合植物生长调节剂吊瓶输液处理来获取生理年龄小的幼态芽供其组织培养时采用的外植体，由此来降低木本植物组织培养难度，有效地完成其组培苗的生产过程，解决因生理年龄大的嫩芽为外植体时带来增殖和生根效率低下的问题。

本发明的第一个目的是提供促发木本植物成年树萌发幼态芽的方法，包括以下步骤：选择木本植物成年树优良单株，在旺盛生长期于树主干距离地面20-40厘米处往上进行剥皮，剥皮时保留韧皮部，剥皮宽度为6-10厘米，剥皮长度为50-100厘米，剥皮后将割口处的韧皮部修整平滑，切割韧皮部及形成层，然后将浓度为400-500mg/L的6-苄基腺嘌呤溶液输入到剥皮位置的韧皮部，定期施肥，其他按常规管理，直至树主干切口位置下方萌发出幼态芽。