[发明专利]杭椒辣椒素浓缩提取测定法

说明书

本发明公开了一种杭椒辣椒素浓缩提取测定法，包括如下步骤：将新鲜辣椒真空冷冻干燥后磨粉，然后采用甲醇‑四氢呋喃溶液进行提取，提取所得的上清液进行浓缩，得浓缩液；将辣椒素和二氢辣椒素的标准品用高效液相色谱‑紫外检测器进行分析，从而获得辣椒素的浓度与色谱峰面积的对应关系以及二氢辣椒素的浓度与色谱峰面积的对应关系；将浓缩液用高效液相色谱‑紫外检测器进行分析，分析条件同上，从而最终获得待测样品中辣椒素和二氢辣椒素的浓度。本方法采用冷冻干燥技术去除鲜辣椒中水分并最大程度保留其活性物质，较其他干燥方法辣椒素的损失减少；同时解决了大批量测定分析时，鲜辣椒无法长期保存的问题。

技术领域

本发明涉及一种辣椒素及二氢辣椒素的提取和测定方法，尤其是对低辣度杭椒中辣椒素含量较低、样品量有限情况下的辣椒素及二氢辣椒素的准确定量。

背景技术

辣椒是世界上重要的蔬菜之一，也是深受喜爱的一种调味品。辣椒营养价值高，具有多种有效成分。其中，主要引起辛辣味的是存在于辣椒中的五类辣椒素类化合物，被统称为类辣椒素。在这5种类辣椒素化合物中，辣椒素和二氢辣椒素占总量的90％左右，也提供了90％左右的辣感和热感。辣椒素亦是一种抗氧化物质，并能加速脂肪代谢。因此，辣椒和二氢辣椒素是辣椒最重要的品质指标之一，它们的提取和测定具有重要的价值和意义。

目前，辣椒素的提取方法主要有溶剂提取法、超临界CO₂提取法、超声波提取法、微波提取法、酶法提取等，其中溶剂提取法是国内最常见的提取方法之一。CN 102516802A山东凯斯达机械制造有限公司的“萃取辣椒红色素及辣椒素的方法”用得就是正己烷和丙酮混合剂进行萃取；超临界CO₂提取法和微波提取法效果虽好但需要昂贵的设备，如CN101735092A浙江中味酿造有限公司“一种利用超临界CO₂流体从黄樱椒中萃取出辣椒素的方法”用的就是超临界CO₂提取法。此外，传统辣椒素提取技术采用烘干样品，或者直接使用鲜样进行提取，过程中操作复杂，辣椒素损失较大。

面对样品量少、辣椒素含量过低的样品(如杭椒)提取时，常常无法使用传统提取方法获得准确数据，还存在提取过程中溶剂损耗较多，提取操作繁琐，费时费力等问题。在辣椒素检测中，常用的方法包括比色法、分光光度法和各种色谱法等。CN 102313708A北京市农林科学院“辣椒素的定量检测方法”和CN102313710A“二氢辣椒素的定量检测方法”使用近红外光谱仪采样后与化学检测方法建立联结；农业部发布的农业行业标准(NYT1381-2007)等方法采用液相色谱结合荧光检测器的方法，这些检测仪器相对来说都不如紫外检测器普遍，很多时候需要专门购买相关仪器才能进行检测分析。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种结合冷冻干燥技术，浓缩提取和高效液相色谱-紫外检测器分析技术检测杭椒等低辣度辣椒样品中辣椒素和二氢辣椒素含量的方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种杭椒辣椒素浓缩提取测定法，包括如下步骤：

1)、干燥：

以新鲜辣椒作为待测样品，将待测样品用液氮处理15～30秒后放入真空冷冻干燥机中冷冻干燥，直至含水率≤0.5％；

2)、磨粉：

将步骤1)冷冻干燥后辣椒粉碎至过50目筛；

3)、提取：

按照1g/2～10ml的料液比，在步骤2)所得的辣椒冻干粉末中加入甲醇-四氢呋喃溶液，用超声波仪提取5～30分钟后离心；分别得上清液和沉淀；

所述甲醇-四氢呋喃溶液由甲醇、四氢呋喃按照1:1的体积比混合而得；

4)、浓缩：

于60±0.5℃恒温水浴中，将步骤3)所得的上清液浓缩至原体积五分之一，得浓缩液；