[发明专利]一种弧菌测试片及其制备方法

说明书

本发明公开了一种弧菌测试片，包括测试片主体、弧菌培养基以及水凝胶载体，弧菌培养基包括以质量百分数计算的以下组分：蛋白胨2.2‑3.5％、蔗糖1.5‑2.0％、牛胆粉0.2‑0.4％、硫代硫酸钠0.08‑0.15％、柠檬酸铁0.05‑0.12％、麝香草酚蓝0.002‑0.005％、酵母1.0‑1.5％、氯化钠0.8‑1.0％、去氧胆酸钠0.12‑0.2％、柠檬酸三钠0.5‑1.0％、溴麝香草酚蓝0.002‑0.004％、黄原胶0.1‑0.3％、纯水余量，弧菌培养基的pH值为9.0‑9.3。本发明还公开了弧菌测试片的制备方法。本发明便于水体样本在培养基中吸收和扩散，为弧菌的提供良好的生长环境。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，更具体地说，涉及一种弧菌测试片及其制备方法。

背景技术

弧菌是中国对虾育苗期间的常见菌，一旦虾塘水质恶化，很容易导致细菌性疾病的流行。如果能对养殖水体中的细菌含量提前进行监测，如副溶血弧菌，溶藻弧菌的数量等，通过提前检测，提前预警，及时采取措施，即可对弧菌的发病起到控制作用。

弧菌的检测方法研究较多，也较深入，其中环介导等温扩增(LAMP)技术、PCR(荧光定量、双重实时、EMA-PCR、巢氏PCR、Real-time PCR)检测技术主要用于其分子检测及基因分型的研究、ELISA方法(间接法、斑点法、双抗夹心法)，胶体金试纸条法均为基于其抗体的病原检测方法，传统的有细菌分离培养、生化鉴定等，但对致病菌的检测特异性不高、灵敏度低、操作烦琐耗时，也有利用快速酶促反应显色培养基、自动化微生物分析仪进行鉴定的方法。

基于增菌技术的弧菌检测片在食品的检验检疫中应用较多，主要用于水产品、海产品及其腌、熟制品、水产调味品等的快速检测，主要的生产厂家有美国3M公司，德国R-BIOPHARN公司，日本CHISSO公司，广州绿洲生化。但目前市场上未见针对检测水体内(池塘水、各类养殖水体)的弧菌的测试片，一种适用于监测水体中的弧菌(主要为副溶血弧菌和溶藻弧菌)，操作简便的测试片，从而为水体内弧菌含量的预警，用药前后效果比对提供技术手段。

现有测试片载体主要为滤纸，冷水可凝胶和无纺布三种，且对检测效果有重要影响。以滤纸为载体的测试片滤孔过大，容易上下层都长菌，影响计数结果；无纺布为载体的测试片虽然具有使样本扩散迅速的特点，但是无纺布的不透明性影响最终的计数结果。

发明内容

针对现有技术的上述缺陷，本发明的目的在于提供一种弧菌测试片；使弧菌培养基能长时间在室温环境下保存，便于水体样本在培养基中吸收和扩散，为弧菌的提供良好的生长环境，加快弧菌的生长速度。

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：

一种弧菌测试片，包括测试片主体、弧菌培养基以及水凝胶载体，所述弧菌培养基包括以质量百分数计算的以下组分：蛋白胨2.2-3.5％、蔗糖1.5-2.0％、牛胆粉0.2-0.4％、硫代硫酸钠0.08-0.15％、柠檬酸铁0.05-0.12％、麝香草酚蓝0.002-0.005％、酵母1.0-1.5％、氯化钠0.8-1.0％、去氧胆酸钠0.12-0.2％、柠檬酸三钠0.5-1.0％、溴麝香草酚蓝0.002-0.004％、黄原胶0.1-0.3％、纯水余量，所述弧菌培养基的pH值为9.0-9.3。

作为进一步的方案，本发明所述的测试片主体包括透明塑料底板和带格子的透明塑料薄膜片，所述透明塑料底板上设有培养槽，所述透明塑料薄膜片的一侧或一个角粘合固定在透明塑料底板表面，远离透明塑料薄膜片与透明塑料底板固定处透明塑料薄膜片的一端延伸出揭膜端。

作为进一步的方案，本发明所述的水凝胶载体为冷水可凝胶，所述冷水可凝胶为黄原胶和瓜尔胶的水凝胶。

作为进一步的方案，本发明所述的水凝胶的质量浓度为0.2-0.8％，其中黄原胶和瓜尔胶的质量比为1:(1-2)。