[发明专利]一种纯化利拉鲁肽的方法在审
| 申请号： | 201711476366.6 | 申请日： | 2017-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN107903318A | 公开（公告）日： | 2018-04-13 |
| 发明（设计）人： | 肖英;周金玉;周奕;王蔡典;玄其存;李杰;赵呈青 | 申请（专利权）人： | 江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/605 | 分类号： | C07K14/605;C07K1/36;C07K1/02;C07K1/20 |
| 代理公司： | 连云港润知专利代理事务所32255 | 代理人： | 刘喜莲 |
| 地址： | 222000 江苏省连云*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 纯化 利拉鲁肽 方法 | ||
1.一种纯化利拉鲁肽的方法，其特征在于：将利拉鲁肽粗品溶于乙腈水溶液中得到利拉鲁肽粗肽水溶液；过滤，滤液以反相聚合物色谱填料为固定相、盐酸和乙腈为流动相进行HPLC线性梯度洗脱；取含有利拉鲁肽的馏分；旋蒸除去部分乙腈，得到利拉鲁肽一次纯化溶液；取利拉鲁肽一次纯化溶液，以八烷基硅烷键合硅胶为固定相、磷酸和乙腈为流动相进行HPLC线性洗脱，收取含有利拉鲁肽的馏分；旋蒸除去部分乙腈，得到纯化的利拉鲁肽溶液。
2.根据权利要求1所述的纯化利拉鲁肽的方法，其特征在于，其具体步骤如下：
（1）将利拉鲁肽粗品溶于乙腈水溶液中得到利拉鲁肽粗肽水溶液；
（2）取利拉鲁肽水溶液用0.22um滤膜过滤除去不溶性颗粒，收集滤液备用；
（3）取滤液，以反相聚合物色谱填料为固定相，检测波长为230nm进行HPLC线性梯度洗脱，流动相A为：0.1%盐酸，氨水调pH=7.0的水溶液，流动相B为：纯乙腈；洗脱梯度初始梯度B相5%保持5min，然后60min至45%；收取含有利拉鲁肽的馏分；
（4）用旋转蒸发器水浴温度在30~35℃，真空度在-0.09MPa以下除去部分乙腈；得到利拉鲁肽一次纯化溶液；
（5）取利拉鲁肽一次纯化溶液，以八烷基硅烷键合硅胶为固定相，检测波长为230nm进行HPLC线性洗脱，0.09%磷酸为A相，含有0.09%磷酸的乙腈溶液为B相；洗脱梯度初始梯度B相5%保持5min，然后60min至55%，收取含有利拉鲁肽的馏分；
（6）用旋转蒸发器水浴温度在30~35℃，真空度在-0.09MPa以下除去部分乙腈，得到纯化的利拉鲁肽溶液。
3.根据权利要求2所述的纯化利拉鲁肽的方法，其特征在于，步骤（4）中：水浴温度为32~33℃。
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