[发明专利]从鱿鱼缠卵腺中提取抗氧化活性多肽的方法

说明书

本发明公开了从鱿鱼缠卵腺中提取抗氧化活性多肽的方法，具体为：将鱿鱼缠卵腺中加入NaOH水溶液中超声波浸泡，水洗至中性，最后用异丙醇溶液浸泡脱脂，洗净沥干；向预处理的缠卵腺中加入甘氨酸‑NaOH缓冲液，混合均匀，依次用碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解得酶解液；将酶解液经超滤膜进行分级得到超滤酶解液，然后将超滤酶解液依次经凝胶柱层析、离子交换树脂层析和反相高效液相色谱纯化，即得抗氧化活性多肽。有益效果为：本发明提取方法提取率高，提取方法简单，易于工业化生产，安全性更高，提高鱿鱼缠卵腺附加值，得到的抗氧化活性多肽颜色较白、无鱼腥味、热稳定性好。

技术领域

本发明涉及鱼类产品深加工技术领域，尤其是涉及从鱿鱼缠卵腺中提取抗氧化活性多肽的方法。

背景技术

鱿鱼，虽然习惯上称它们为鱼，其实它并不是鱼，而是生活在海洋中的软体动物。鱿鱼属于软体动物门，头足纲，枪乌贼科，通称枪乌贼。体色苍白，体圆锥形，头大，有淡褐色斑，前方生有10条触足，常成群游弋于深约20米的海洋中。常活动于浅海中上层，垂直移动范围达百余米。肉质细嫩，风味类似于鲍鱼，但价格很低，被成为“穷人的鲍鱼”。西方人因为鱿鱼表皮暗且易变，而称鱿鱼为“魔鬼鱼”；西班牙人吃鱿鱼比较多，他们把鱿鱼加工成不同风味的罐头，鱿鱼酱油，鱿鱼圈等；美国人近几年来也开始提倡吃鱿鱼，他们把鱿鱼加工成类似鲍鱼的形态出售；鱿鱼在日本很受欢迎，已成为日本日常生活中必不可少的水产品，日本人把鱿鱼一般加工成冷冻制品、干制品、珍味制品、盐渍制品、加热杀菌制品。近年来，鱿鱼加工产量日益扩大，但在加工过程中一般仅对其酮体进行加工，产生50%左右的内脏等副产物，其中生殖腺(缠卵腺、精巢、卵巢等)占了鱿鱼内脏的20%～30%。缠卵腺在头足类中普遍存在，位于直肠两侧内脏囊壁上，墨囊的两侧，呈白色卵状，与头足类的生殖活动密切相关。据相关研究报道，海洋生物的生殖腺大都营养丰富，常含有多种活性物质，但这部分研究常常被人们忽视，未得到合理和高值化的开发，亟待能获得合理充分的利用。符合当今海洋生物活性物质研究的发展趋势，亦是高值化利用低值加工副产物的重要途径，为今后水产品加工和活性物质的开发利用起到了良好的科学先导作用；能够提高鱿鱼加工的附加值，增加企业的经济效益；同时，这也是合理利用资源开展综合利用、减少资源浪费及环境污染、保护环境维持生态平衡、实现可持续发展的重要方式。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗氧化活性多肽提取率高，提取方法简单，易于工业化生产，安全性更高，提高鱿鱼缠卵腺附加值，得到的抗氧化活性多肽颜色较白、无鱼腥味、热稳定性好的从鱿鱼缠卵腺中提取抗氧化活性多肽的方法。

本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：

从鱿鱼缠卵腺中提取抗氧化活性多肽的方法，包括预处理、双酶水解、分离纯化，其具体步骤为：

预处理：将鱿鱼缠卵腺清水洗净，沥干，切碎后再组织捣碎，按料液比为1:7-9加入浓度为0.8-1.3‰的NaOH水溶液中，NaOH水溶液中含有0.4-0.6%微波改性活性炭，在超声波功率为150-200W、温度为2-5℃下超声波浸泡2-4h，水洗至中性，最后按料液比为1:20-24向鱿鱼缠卵中加入浓度为8-12%的异丙醇溶液，在温度为2-5℃浸泡脱脂10-15h，用蒸馏水洗净沥干，备用，鱿鱼缠卵腺中含有很多杂蛋白及脂肪，所以要先进行前处理，来去除这些杂蛋白、脂肪及色素等，可减少此类物质对鱿鱼缠卵腺蛋白的影响，该步骤可以去除缠卵腺上的杂蛋白、脂肪及色素等，采用微波改性活性炭和超声波结合进行脱色，超声波具有强烈的分散作用和空化效应，使得活性炭能和缠卵腺充分接触，能使活性炭快速吸附色素，能显著提高活性炭和鱿鱼缠卵腺的反应效果，提高活性炭的利用率；