[发明专利]一种四氧化三铁-海藻酸钠-聚乙烯亚胺纳米复合物基因载体及其制备方法在审
| 申请号： | 201711475321.7 | 申请日： | 2017-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN108148869A | 公开（公告）日： | 2018-06-12 |
| 发明（设计）人： | 曹诗林;赖林浩;古伟明;王晓君;梁世濠;杨冰娜 | 申请（专利权）人： | 佛山科学技术学院 |
| 主分类号： | C12N15/87 | 分类号： | C12N15/87 |
| 代理公司： | 广东广信君达律师事务所 44329 | 代理人： | 杨晓松 |
| 地址： | 528000 广东省佛山市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 磁性纳米 内核 聚乙烯亚胺 海藻酸钠 基因载体 纳米复合物 四氧化三铁 基因转染 紧密配合 转染效率 制备 生物相容性 回收利用 磁响应 导向性 高基因 包覆 多层 基因 | ||
1.一种四氧化三铁-海藻酸钠-聚乙烯亚胺多层纳米复合物基因载体，其特征在于：包括磁性纳米内核、包覆在磁性纳米内核外的外壳1和外壳2，磁性纳米内核和外壳1紧密配合，外壳1和外壳2紧密配合；磁性纳米内核的材料为Fe3O4，外壳1的材料为海藻酸钠(分子式为(C6H11NO4)m)，外壳2的材料为聚乙烯亚胺(分子式为(CH2CH2NH)n)。
2.一种权利要求1所述的四氧化三铁-海藻酸钠-聚乙烯亚胺多层纳米复合物基因载体的制备方法，其特征在于包括下述步骤：
(1)将可溶性的二价铁盐和三价铁盐、海藻酸钠加入反应容器，然后加入水充分溶解分散；
(2)再加入氨水、环氧氯丙烷进行反应，制得含有海藻酸钠外壳1的磁性Fe3O4；
(3)将含有海藻酸钠外壳1的磁性Fe3O4、聚乙烯亚胺和环氧氯丙烷加入反应容器中，然后加入1-乙基-3-甲基咪唑乙酸盐的水溶液(水分含量为1％～99％)，搅拌反应，制得具有核壳结构的四氧化三铁-海藻酸钠-聚乙烯亚胺多层纳米复合物基因载体。
3.根据权利要求2所述的四氧化三铁-海藻酸钠-聚乙烯亚胺多层纳米复合物基因载体的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，二价铁盐、三价铁盐和海藻酸钠的摩尔质量比1:(1.5～5):(1～2)，其中二价铁盐、三价铁盐按铁元素的摩尔质量计，海藻酸钠按糖残基的摩尔质量计。
4.根据权利要求2所述的四氧化三铁-海藻酸钠-聚乙烯亚胺多层纳米复合物基因载体的制备方法，其特征在于：二价铁盐为硫酸亚铁、硝酸亚铁、氯化亚铁；三价铁盐为硫酸铁、硝酸铁、氯化铁。
5.根据权利要求2所述的四氧化三铁-海藻酸钠-聚乙烯亚胺多层纳米复合物基因载体的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，反应的温度为60～90℃，反应的时间为1～3小时。
6.根据权利要求2所述的四氧化三铁-海藻酸钠-聚乙烯亚胺多层纳米复合物基因载体的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，环氧氯丙烷与海藻酸钠的摩尔质量比为(1～2):1，氨水与铁盐中铁元素的摩尔质量比为(3～6):1。
7.根据权利要求2所述的四氧化三铁-海藻酸钠-聚乙烯亚胺多层纳米复合物基因载体的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，含有海藻酸钠外壳1的磁性Fe3O4与聚乙烯亚胺的摩尔质量比为1:(5～10)；环氧氯丙烷与聚乙烯亚胺的摩尔质量比为1:(1～2)；含有海藻酸钠外壳1的磁性Fe3O4与1-乙基-3-甲基咪唑乙酸盐的水溶液的质量比为1:(20-200)。
8.根据权利要求2所述的四氧化三铁-海藻酸钠-聚乙烯亚胺多层纳米复合物基因载体的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，聚乙烯亚胺的分子量为25kDa-750kDa。
9.根据权利要求2所述的四氧化三铁-海藻酸钠-聚乙烯亚胺多层纳米复合物基因载体的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，搅拌反应的温度为30～60℃，时间为5min～24h。
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