[发明专利]一种核壳结构的磁性壳聚糖聚乙酰亚胺纳米基因载体及其制备方法在审
| 申请号: | 201711475288.8 | 申请日: | 2017-12-29 |
| 公开(公告)号: | CN108148867A | 公开(公告)日: | 2018-06-12 |
| 发明(设计)人: | 曹诗林;古伟明;赖林浩;王晓君;梁世濠;杨冰娜 | 申请(专利权)人: | 佛山科学技术学院 |
| 主分类号: | C12N15/87 | 分类号: | C12N15/87;C08G81/00;C08B37/08 |
| 代理公司: | 广东广信君达律师事务所 44329 | 代理人: | 杨晓松 |
| 地址: | 528000 广东省佛山市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 磁性纳米 内核 纳米基因载体 磁性壳聚糖 聚乙酰亚胺 核壳结构 基因转染 紧密配合 转染效率 制备 聚乙烯亚胺 生物相容性 回收利用 基因载体 磁响应 导向性 高基因 壳聚糖 包覆 基因 | ||
1.一种核壳结构的磁性壳聚糖聚乙酰亚胺纳米基因载体,其特征在于:包括磁性纳米内核、包覆在磁性纳米内核外的外壳1和外壳2,磁性纳米内核和外壳1紧密配合,外壳1和外壳2紧密配合;磁性纳米内核的材料为Fe3O4,外壳1的材料为壳聚糖(分子式为(C6H11NO4)m),外壳2的材料为聚乙烯亚胺(分子式为(CH2CH2NH)n)。
2.根据权利要求1所述的核壳结构的磁性壳聚糖聚乙酰亚胺纳米基因载体,其特征在于:聚乙酰亚胺表面带有强正电荷(zeta电位>20mV),而磁性Fe3O4内核带有强负电荷(zeta电位<-20mV)。
3.一种权利要求1或2所述的核壳结构的磁性壳聚糖聚乙酰亚胺纳米基因载体的制备方法,其特征在于包括下述步骤:
(1)将可溶性的二价铁盐和三价铁盐、壳聚糖加入反应容器,采用溶剂充分溶解,然后加入试剂A进行反应,得到含有壳聚糖外壳1的磁性Fe3O4;
(2)将含有壳聚糖外壳1的磁性Fe3O4、聚乙烯亚胺(分子量为25kDa-750kDa)和戊二醛加入反应容器中,然后加入试剂B,搅拌反应,制得核壳结构的磁性壳聚糖聚乙酰亚胺纳米基因载体。
4.根据权利要求3所述的核壳结构的磁性壳聚糖聚乙酰亚胺纳米基因载体的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,二价铁盐、三价铁盐和壳聚糖的摩尔质量比1:(1.5~2.5):(1~2),其中二价铁盐、三价铁盐按铁元素的摩尔质量计,壳聚糖按氨基葡萄糖残基的摩尔质量计;二价铁盐为硫酸亚铁、硝酸亚铁、氯化亚铁;三价铁盐为硫酸铁、硝酸铁、氯化铁。
5.根据权利要求3所述的核壳结构的磁性壳聚糖聚乙酰亚胺纳米基因载体的制备方法,其特征在于:步骤(1),所述溶剂是1%乙酸溶液。
6.根据权利要求3所述的核壳结构的磁性壳聚糖聚乙酰亚胺纳米基因载体的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述试剂A是三聚磷酸钠、水和氨水溶液。
7.根据权利要求3所述的核壳结构的磁性壳聚糖聚乙酰亚胺纳米基因载体的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,反应的温度为60~90℃,反应的时间为0.5~3小时。
8.根据权利要求3所述的核壳结构的磁性壳聚糖聚乙酰亚胺纳米基因载体的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,试剂B是1-乙基-3-甲基咪唑盐酸盐。
9.根据权利要求3所述的核壳结构的磁性壳聚糖聚乙酰亚胺纳米基因载体的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,含有壳聚糖外壳1的磁性Fe3O4、聚乙烯亚胺的质量比为1:(1~2);聚乙烯亚胺和戊二醛的质量比为1:(1~2);1-乙基-3-甲基咪唑盐酸盐与三种物质(含有壳聚糖外壳1的磁性Fe3O4、聚乙烯亚胺、戊二醛)质量之和的比例为(5~100):1。
10.根据权利要求3所述的核壳结构的磁性壳聚糖聚乙酰亚胺纳米基因载体的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,搅拌反应的温度为30~90℃,时间为0.1~24小时。
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