[发明专利]检测血液中奥氮平药物含量的液相色谱分析方法

说明书

本发明检测血液中奥氮平药物含量的液相色谱分析方法是使用液相色谱分析仪和紫外检测器对标准溶液进行标定，拟合得到标准曲线方程为y＝a*x+b，取待测血液样品，在该待检测血液经过处理后，同样使用液相色谱分析仪和紫外检测器对待测的样品进行检测，得到待测血液y值，将待测血液y代入标准曲线方程中，通过计算得到待检测血液中的奥氮平药物浓度，该方法是外标法与高效液相色谱法相结合，更适于高通量样本检测；采用小粒径色谱柱和低流速，减少有机溶剂的耗费，使实验成本降低且环保，更利于在临床治疗中对患者体内的奥氮平血药浓度进行监测，为抗精神病药物奥氮平的个性化给药、减少毒副反应的发生提供实验基础。

技术领域

本发明涉及精神类药物的血药浓度监测技术领域，尤其涉及一种检测血液中奥氮平药物浓度的方法。

背景技术

奥氮平(Olanzapine，OLZ)，分子式C₁₇H₂₀N₄S，具体结构如下图1所示。奥氮平为黄色结晶性粉末，熔点为191-196℃。精神分裂症是常见的精神障碍性疾病，我国成人终身发病率约为1％-2％。奥氮平是常用的传统非典型抗精神病药，在体内吸收迅速，具有强大的镇静催眠作用，用于治疗精神分裂症、精神病性障碍和情感障碍。奥氮平的日推荐剂量为5-20mg，文献报道治疗精神分裂症的有效血清或血浆阈浓度仅为9μg/L，其血药浓度与药理作用具有相关性，且和靶组织浓度具有显著相关，但药动学个体差异大，可能发生严重的不良反应，影响疗效，故有必要检测奥氮平血药浓度。

奥氮平血药浓度的常用检测方法有高效液相色谱-紫外检测法、高效液相色谱-电化学法、气相色谱-质谱法、液相色谱-质谱联用法等。LC-MS/MS法灵敏度高，但稳定性较差，且成本很高，对人员与场地要求较高。2D-LC/UV分离效果好，灵敏度高，具有较高的稳健性及自动化能力，但目前检测方法所需血液的量很大，且前处理过程中消耗的试剂量也较大。

发明内容

针对上述技术问题，本发明目的是提供一种检测血液中奥氮平药物浓度的方法，使奥氮平血药浓度的测定快速准确，并缩短样品分析时间，通过优化前处理方案，提高回收率和检测灵敏度。

本发明采用以下技术方案：

本发明的检测血液中奥氮平药物含量的液相色谱分析方法，其中：它包括以下步骤：

(一)标准溶液的标定

首先将至少三种不同浓度的标准工作液10μL和190μL空白血清或血浆分别置于1.5ml离心管中混合制成至少三种标准溶液，上述标准溶液分别在转速为800-1200rpm下涡旋混匀1-2min后，加入含有5-20％体积乙酸乙酯的甲基叔丁基醚萃取剂的1000μL，并在转速为1200-2000rpm下涡旋混匀4-6min后，再加入10mol/L的NaOH溶液200μL，并在1200-2000rpm的转速下涡旋混合4-6min后，再在10000-15000rpm的转速下高速离心8-12min，得到清液，分别取上述清液720ul置于另一个1.5ml离心管中，在常温下用N₂缓慢吹干；向上述吹干的离心管中加入由6∶4的甲醇和水组成的复溶液100μL，然后在1200-2000rpm转速下涡旋混匀1-2min后，再在10000-15000rpm的转速下高速离心4-6min，得到上清液，分别取上述上清液90uL，用液相色谱分析仪和紫外检测器对上述上清液进行检测，得出上述至少三种标准溶液的奥氮平色谱图，以上述至少三个标准溶液的奥氮平峰面积作为标准曲线图的纵坐标y，以上述标准工作液中含有奥氮平的浓度作为标准曲线图的横坐标x，将以上检测所得至少三组数据进行线性回归，拟合得到标准曲线方程为y＝a*x+b，并且得出权重系数a和b；所述标准工作液为含有奥氮平的溶液；

(a)标准工作液的配制：