[发明专利]电穿孔方法与设备

权利要求书

1.一种生物细胞电穿孔装置，其特征在于，包括：

样品容器，具有用于容纳细胞的绝缘室体，所述样品容器具有第一电极和第二电极以提供电连接以实现电穿孔；以及

第一导电介质层，含有具有溶质离子的溶液，所述第一导电介质层一端与所述第一电极接触，另一端形成界面，

其中，所述第一导电介质层用于隔开细胞与所述第一电极的接触，所述第一导电介质层用于通过所述溶质离子将电脉冲传导至细胞样品以进行电穿孔或者电融合，以及

所述第一导电介质层的所述界面上用于形成至少一个细胞单层，

所述第一导电介质层为上层介质层或下层介质层。

2.根据权利要求1所述的装置，其特征在于，所述第一电极和第二电极中的至少一个是可移动电极且用作密封盖，以在电穿孔过程中将细胞样品限制在绝缘室体内且位于第一电极和第二电极之间。

3.根据权利要求1所述的装置，其特征在于，所述绝缘室体的壁的一端具有容纳槽以容纳多余的液体。

4.根据权利要求1所述的装置，其特征在于，还包括预先制作好的多孔性固体基质，其中，所述下层介质层制作在所述多孔性固体基质中。

5.根据权利要求1所述的装置，其特征在于，还包括有助于把细胞样品中的悬浮细胞形成为至少一个细胞单层的离心机。

6.根据权利要求5所述的装置，其特征在于，还包括在旋转过程中给样品容器提供用于电穿孔的电脉冲的脉冲发生器。

7.根据权利要求6所述的装置，其特征在于，所述脉冲发生器具有充电电池以实现无线功能。

8.根据权利要求6所述的装置，其特征在于，所述脉冲发生器与所述离心机合为一体。

9.根据权利要求1所述的装置，其特征在于，还包括多个人工绝缘颗粒，用于与细胞一起在所述第一导电介质层的所述界面上形成至少一个细胞单层。

10.根据权利要求4所述的装置，其特征在于，所述多孔性固体基质为硅树脂、树脂、玻璃纤维、聚甲基丙烯酸酯、硅酸盐、改性纤维素、乙烯聚合物、聚赖氨酸、聚丙烯酸、聚乙二醇、聚丙烯酰胺或其共聚合物。

11.根据权利要求4所述的装置，所述下层介质层的形成材料选自基于琼脂或琼脂糖的凝胶、硅凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、胶原蛋白或明胶、基质胶、透明质酸凝胶、海藻酸钙凝胶、聚乙二醇凝胶、基于甲基纤维素或改性纤维素的凝胶、丙烯酸盐凝胶和丙二醇凝胶。

12.一种生物细胞电穿孔的方法，其特征在于，包括：

提供用于电穿孔的样品容器，所述样品容器具有：用于容纳细胞的绝缘室体，提供电连接以实现电穿孔的第一电极和第二电极，以及含有具有溶质离子的溶液的第一导电介质层，所述第一导电介质层一端与所述第一电极接触，另一端形成界面；

利用所述第一导电介质层隔开细胞与所述第一电极的接触；

利用预设电脉冲对所述细胞单层中的细胞进行处理，所述电脉冲通过所述第一导电介质层中的所述溶质离子传导至细胞样品以进行电穿孔或者电融合，

其中，在所述第一导电介质层的所述界面上形成至少一个细胞单层，所述第一导电介质层为上层介质层或下层介质层。

13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，还包括：

用密封盖将细胞样品密封在所述样品容器中。

14.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，还包括：

由细胞在自然重力作用下在所述第一导电介质层的界面上形成至少一个细胞单层。

15.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，还包括：

利用离心作用使细胞在所述第一导电介质层的界面上形成至少一个细胞单层。

16.根据权利要求15所述的方法，其特征在于，还包括：

在离心过程中采用预设电脉冲对所述细胞进行处理。