[发明专利]一种检测氟苯尼考的免疫学试剂盒

说明书

本发明公开了一种检测氟苯尼考的免疫学试剂盒。本发明首先以氟苯尼考衍生物与载体蛋白的偶联物为氟苯尼考完全抗原，然后免疫骆驼科动物制备了氟苯尼考免疫检测抗体。本发明制备获得的高亲和力的氟苯尼考骆驼科动物抗体，氟苯尼考的羊驼多克隆抗体为1:32000，氟苯尼考的双峰驼多克隆抗体效价为1:256000；可研究开发出氟苯尼考酶联免疫检测试剂盒，该试剂盒对氟苯尼考检测限为0.3 ng/mL，半数抑制浓度为13.3 ng/mL，能够实现氟苯尼考的高通量、快速、灵高敏的检测要求。该试剂盒可用于畜禽、水产品等动物性食品中氟苯尼考的残留检测，操作简便、灵敏度高、价格低廉，非常适合大量样品的筛查，具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明涉及食品安全免疫检测技术领域检测技术领域，更具体地，涉及一种检测氟苯尼考的免疫学试剂盒。

背景技术

自农业部2002年193号公告明确规定氯霉素禁用于所有食品动物，目前氟苯尼考已成为氯霉素禁用后的主要替代品。氟苯尼考的杀菌力强、使用之后耐药率低，被广泛应用于畜禽和水产动物的细菌性疾病，具有良好的治疗效果。但是，随着氟苯尼考的大量、不规范使用，它在畜禽、水产品等动物性食品中的残留问题也日益被重视。

目前，检测动物性食品中的氟苯尼考的主要方法为仪器法，虽然仪器残留检测已经可以实现对氟苯尼考的检测，但所需仪器复杂昂贵，而且样品前处理繁琐费时，操作需专业人员、检测费用高，很难适应现场快速检测的需要。为了实现氟苯尼考的高通量、快速、灵敏检测要求，研究开发针对氟苯尼考的酶联免疫检测试剂盒十分迫切。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术的不足，用氟苯尼考衍生物与载体蛋白的偶联物作为氟苯尼考完全抗原免疫骆驼科动物，制备获得高亲和力的氟苯尼考骆驼科抗体，并利用次抗体制备用于检测氟苯尼考的免疫学试剂盒。

本发明的第一个目的是提供一种氟苯尼考完全抗原。

本发明的第二个目的是提供一种氟苯尼考的骆驼科动物抗体。

本发明的第三个目的是提供所述的骆驼科动物抗体在检测氟苯尼考和制备检测氟苯尼考的免疫学试剂盒中的应用。

本发明的第四个目的是提供一种检测氟苯尼考的免疫学试剂盒。

本发明的第五个目的是提供所述的免疫学试剂盒在检测氟苯尼考的应用。

为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案予以实现的：

一种氟苯尼考完全抗原是氟苯尼考衍生物与载体蛋白的偶联物；所述氟苯尼考衍生物的结构如下：

优选地，所述氟苯尼考完全抗原，所述载体蛋白为牛血清白蛋白(BSA)或鸡卵白蛋白(OVA)。

一种氟苯尼考的抗体，所述抗体为所述氟苯尼考完全抗原免疫骆驼科动物制备得到。

优选地，骆驼科动物为羊驼、双峰驼或单峰驼。

优选地，所述的抗体的制备方法为：

S1.用权利要求1或2所述氟苯尼考完全抗原免疫羊驼；

S2.然后分别在第22、36、50、64天各加强免疫一次；

S3.在第71天，采集全血，收集纯化氟苯尼考羊驼多克隆抗体。

更优选地，步骤S1中氟苯尼考完全抗原的用量为750μg；步骤S2中氟苯尼考完全抗原的用量为500μg

优选地，所述的抗体的制备方法为：

S1.用权利要求1或2所述氟苯尼考完全抗原免疫双峰驼；

S2.然后分别在第15、29、43、57、71天各加强免疫一次；