[发明专利]一种circRNA基因在制备诊断慢性粒细胞性白血病试剂中的应用

说明书

本发明属于分子生物学和医学领域，具体涉及一种circRNA基因在制备诊断慢性粒细胞性白血病中的应用。本发明提供了检测circDOPEY2表达水平的试剂在制备诊断慢性粒细胞性白血病产品中的用途，其中试剂盒产品检测简单、准确、快速，特异性强，对于慢性粒细胞性白血病患者实施有效的早诊、早治和个体化防治具有重要意义。

技术领域

本发明属于分子生物学和医学领域，具体涉及一种circRNA基因在制备诊断慢性粒细胞性白血病试剂中的应用。

背景技术

慢性粒细胞性白血病(chronic myelogenous leukemia，CML)是一类造血干细胞恶性克隆性疾病。克隆性白血病细胞因为增殖失控、分化障碍、凋亡受阻等机制在骨髓和其它造血组织中大量增殖累积，并浸润其它非造血组织和器官，同时抑制正常造血功能。90％以上的病例均具有CML的标记染色体-ph染色体，其是由于9号染色体长臂上C-ABL原癌基因易位至22号染色体长臂的断裂点簇集区(BCR)形成BCR-ABL融合基因。因而BCR-ABL1融合基因是经典的CML分子标志物。

酪氨酸激酶抑制剂(tyrosinekinaseinhibitor，TKI)能选择性抑制BCR/ABL蛋白的酪氨酸激酶活性，可显著改善CML患者的预后。然而，随着临床上的广泛应用和时间的推移，TKI的耐药现象日益明显，复发率逐渐升高严重影响了CML的治疗效果。治疗上，羟基脲、阿糖胞苷等曾被广泛应用，但是，以上疗法均不能取得分子生物学缓解。因而寻找新的CML靶点以便可以尽早诊断，是目前所亟需的。

环状RNA(CircularRNA,circRNA)是一类广泛存在于生物体内的单链非编码RNA，最早发现于20世纪70年代的植物类病毒中，随后陆续在酵母菌线粒体内被发现。在早期的研究中，circRNA被认为形成于外显子转录本的错误剪接，作为随机产物并不具备生物学功能，因而相关报道较为少见。近年来，随着生物信息学及高通量测序技术的迅速发展，大量circRNA被发现并引起关注。越来越多的证据表明，circRNA并非偶然产生，其丰度高、结构稳定并存在时空表达特异性，很可能在调控生物体基因表达过程中发挥重要作用。

前期本申请人经过深入而广泛的研究，发现一类特殊的非编码RNA—环状RNA(circRNA)在肿瘤和正常组织中表达存在显著差异。因而申请人通过基因芯片和定量PCR技术，对大量候选circRNA基因进行了测定和分析，首次发现DOPEY2的circRNA(circDOPEY2)和慢性粒细胞性白血病患者临床诊断密切相关。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于诊断慢性粒细胞性白血病产品，可以尽早诊断，以方便患者尽早治疗，增加治愈或延长患者生命期限。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明第一个方面，提供了检测circDOPEY2表达水平的试剂在制备诊断慢性粒细胞性白血病产品中的用途。

本发明第二个方面，提供一种诊断慢性粒细胞性白血病的产品，所述产品包括试剂盒，所述试剂盒包括可以检测circDOPEY2表达水平的PCR反应试剂。

本发明第三个方面，提供一种非诊断目的的是否存在circDOPEY2基因及其定量检测方法，步骤如下：

(1)用权利要求1或2所述的引物扩增待检样品，得到扩增产物；

(2)对扩增产物进行序列测定，检测扩增产物中是否存在circDOPEY2；

(3)与内参基因GAPDH相比，利用2^-ΔCt方法，计算circDOPEY2的表达量。

与现有技术相比，本发明的技术方案具有如下有益效果：