[发明专利]一种番石榴叶三萜类化合物的提纯方法

说明书

本发明公开了一种番石榴叶三萜类化合物的提纯方法，包括如下步骤：(1)将番石榴叶清洁、烘干、粉碎成粉末(2)利用超声波提取法对番石榴叶粉末进行浸提，收集提取液；(3)将得到的三萜类粗提液进行真空抽滤并收集滤液，然后浓缩滤液并收集浓缩液，用有机微孔滤膜过滤得到三萜类富集物；(4)将三萜类富集物采用大孔吸附树脂吸附三萜类物质，洗脱后即获得纯化的番石榴叶三萜类化合物。本发明的提纯方法，建立了超声波提取法、大孔吸附树脂纯化和高效液相色谱法(HPLC)一体的分离纯化方法，具有耗能少，提取速度快、产率和纯度高的优点，相比常规的溶剂萃取法的产率提高了60％以上，纯度由原来的60‑65％提高到了90％以上。

技术领域

本发明属于化合物提取领域，尤其涉及一种番石榴叶三萜类化合物的提纯方法。

背景技术

番石榴(Psidium guajava Linn.)桃金娘科乔木，原产南美洲。中国华南各地栽培，常见有逸为野生种，北达四川西南部的安宁河谷，生于荒地或低丘陵上；果供食用；叶含挥发油及鞣质等，供药用，有止痢、止血、健胃等功效；叶经煮沸去掉鞣质，晒干作茶叶用，味甘，有清热作用。对番石榴叶的化学成分研究表明：番石榴叶中含有蛋白质、多糖、多酚、黄酮类化合物和三萜类化合物等。三萜类化合物(triterpenoids)是指在生源关系上由鲨烯衍生而来的萜类物质，通常由6个异戊二稀结构单元联结而成，构成含有30个碳原子的化合物，广泛存在于菌类﹑蕨类﹑单子叶﹑双子叶植物以及动物和海洋生物中。据研究，三萜类化合物具有抗癌、抗炎、抗菌、抗病毒、降低胆固醇、杀软体动物等活性，因而具有很强的研究和开发价值。

为数不多的现有技术中，三萜类化合物的提取一般多采用传统的溶剂萃取法，传统方法提取时间较长、工艺繁琐而且纯度较低，难以满足现代化发展的需求。且目前，尚未见番石榴叶三萜类化合物的提取纯化方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服以上背景技术中提到的不足和缺陷，提供一种番石榴叶三萜类化合物的提纯方法。

为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为提供一种番石榴叶三萜类化合物的提纯方法，包括如下步骤：

(1)将新鲜的番石榴叶清洁、烘干、粉碎成粉末后，过筛备用；

(2)以体积浓度为75％的乙醇作为浸提液，用超声波提取法对所述步骤(1)后得到的番石榴叶粉末进行浸提，收集提取液，该提取液为三萜类粗提液；

(3)将所述步骤(2)后得到的三萜类粗提液进行抽滤并收集滤液，然后浓缩滤液并收集浓缩液，过滤得到三萜类富集物；

(4)将所述步骤(3)后得到的三萜类富集物采用AB-8大孔吸附树脂吸附三萜类物质，洗脱后即获得纯化的番石榴叶三萜类化合物。

采用的超声波提取法需要的溶剂较少，提取的时间短、产品的含量高和操作简单方便，超声波提取番石榴叶中三萜类化合物具有可行性。本发明以体积浓度为75％的乙醇作为浸提液，相较于甲醇毒性大易残留，乙醇无毒易分离，且75％的体积浓度的浸提效果更好。

不同类型的树脂对不同天然产物(如多酚、黄酮、萜类等)的吸附特性不一样，AB-8型大孔吸附树脂是苯乙烯型弱极性共聚体，比表面积高于DM-301，最适宜水溶性、具有弱极性物质的提取、分离、纯化，因此本发明的番石榴叶中三萜类化合物纯化适合采用AB-8树脂。

上述的提纯方法，优选的，所述步骤(1)中，过筛为过40-60目筛。

优选的，所述步骤(2)中，超声波提取法采用的超声频率为800-1000W，番石榴叶与乙醇的料液比为1:10-15g/mL，提取温度为25-30℃。

优选的，所述步骤(2)中，浸提的次数为2-4次，总提取时间为30-35min，其中每次超声提取的时间不低于2s，间歇时间不低于0.5s。