[发明专利]一种牙周组织再生修复膜及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物医学工程技术领域，特别是牙周受损组织修复材料制备技术领域，公开了一种牙周组织再生修复膜及其制备方法。

背景技术

牙周组织结构复杂，包括牙龈、牙周膜、牙骨质和牙槽骨，在患有牙周炎等感染性疾病时可发生结缔组织基质和细胞的破坏，由此使牙周膜细胞的纤维附着丧失，牙槽骨吸收，最终导致牙齿缺失。目前，常规的牙周炎治疗尚不能完全修复缺失牙周组织，而组织工程技术的不断研究正在为临床治疗提高新的方向。一般情况下，完成牙周组织缺失的重建与修复，首先要完成牙周膜、牙骨质、牙槽骨及牙龈的再生，其中种子细胞、诱导因子及支架材料是必不可少的重要因素，在完成体外细胞培养后，就需要借助适合的诱导因子调节细胞的活动和定向分化，并利用生物学支架形成三维空间结构，以促进进一步的诱导修复。

诱导组织再生( guided tissue regeneration，GTR)技术是在牙周局部炎症控制的前提下利用外科方法在牙龈瓣和牙槽骨之间放置屏障膜，以隔离牙龈上皮细胞和周围结缔组织向根面生长，并诱导牙周膜细胞优先在根面上增殖，以达到牙周新附着形成的目的。目前，多种组织工程技术包括可吸收或不可吸收材料制备的屏障膜、诱导细胞增殖与定向分化的细胞因子的使用，以及包括干细胞在内的各种种子细胞使用的探索，都为提高牙周组织再生治疗成功率积累了丰富的研究资料。然而现有的治疗技术效果局限，除了在一些非常局限狭窄的骨下袋缺损或下颌磨牙II 度根分叉病外，在各种重度牙周炎的治疗中并没有达到理想的结果，牙骨质-牙周膜界面结构仍无法形成。由此可见，简单屏障显然还不能实现牙周组织的再生重建。

发明内容

本发明的目的在于针对现有的牙周受损修复材料缺乏诱导修复能力的不足，提供一种牙周组织再生修复膜及其制备方法，该牙周组织再生修复膜免疫原性低，材料来源丰富，具有良好的生物相容性和可降解性能，且具有诱导组织修复能力。且该种再生修复膜所采用的基质为生物可降解材料，可以在组织修复完成后降解成对人体无害的小分子随人体循环排除体外。

为实现上述目的，本发明的技术方案为一种牙周组织再生修复膜，所述的牙周组织再生修复膜为双层多孔网状结构，按重量份数计由聚氧化乙烯10-40份、聚乙烯醇10-50份、Ⅰ型胶原10-15份、羟基磷灰石0.1-0.5份和改性海藻酸钠2-10份组成。

优选的，所述的聚氧化乙烯、聚乙烯醇的分子量均为1×10⁶购于美国Sigma-Aldrich公司，所述的Ⅰ型胶原的分子量为1×10⁵ Da，购于日本Dai gang Biomaterial公司，所述的羟基磷灰石其特征在于，其粒径分布为100-200 nm。

更进一步的，所述的改性海藻酸钠为环形RGD短肽改性海藻酸钠，具体的制备步骤为：称取一定量的海藻酸钠溶解于蒸馏水中配制成质量浓度为3%的海藻酸钠溶液，然后加入2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至7.4，然后按摩尔比M海藻酸钠：M环形RGD短肽=1.5:1加入环形RGD短肽，常温下搅拌8h后，放入透析袋（截留分子量mW=20000）中透析3-4天，然后置于冷冻干燥机中-80℃冷冻干燥，即得环形RGD短肽改性海藻酸钠；

为实现上述目的，本发明的另一技术方案为：一种牙周组织再生修复膜的制备方法，所述的制备方法通过以下步骤实现：（1）纤维膜材料的制备、（2）牙周组织再生膜的纺丝。

进一步的，所述纤维膜材料的制备具体步骤为：

（1）再生膜内层纺丝液制备：按配方比将聚氧化乙烯，Ⅰ型胶原溶解于蒸馏水中，待两者均完全溶解后按配方比加入羟基磷灰石，搅拌6-8小时，即得再生膜内层纺丝液，再生膜内层纺丝液中聚氧化乙烯的含量为10%，Ⅰ型胶原的含量为5%；

2）再生膜外层材料制备：按配方比将聚乙烯醇，改性海藻酸钠依次加入蒸馏水中溶解，即得再生膜外层纺丝液，再生膜外层中聚乙烯醇的含量为10%，改性海藻酸钠的含量为2%。

更进一步的，所述牙周组织再生修复膜的纺丝具体如下：

① 将再生膜内层纺丝液加入到静电纺丝设备中的注射器中，静置30-60 min，排尽注射器的空气；连接辊筒接收器和纺丝喷头间的电线，调节辊筒接收器和纺丝喷头间的距离为15-25 cm；接通高压电源，调节至15~25 kV，启动注射泵，注射泵的输出速度调节至0.8-1.5 mL/h，启动辊筒接收器接收纺丝，辊筒接收器的转速设置为200~350 rpm；待射器内的再生膜内层纺丝液完全输出后，关闭高压电源。