[发明专利]一种麝香石斛组培扩繁育苗的方法

说明书

本发明公开了一种麝香石斛组培扩繁育苗的方法，包括外植体选择的步骤、外植体消毒的步骤、播种的步骤、继代培养的步骤、生根培养的步骤、炼苗、驯化移栽的步骤。本申请的组织培养扩繁方法能够有效的提高麝香石斛种苗的繁育的速度及繁育数量，从母本源头控制种质的稳定性，保证种苗质量，实现麝香石斛优质种子种苗的工厂化生产，满足生产需求，缓解资源稀缺的现况。

技术领域

本发明涉及一种组织培养育苗技术，尤其涉及一种麝香石斛组培扩繁育苗的方法。

背景技术

麝香石斛(Dendrobium parishii)为兰科，石斛属原种石斛，主要分布在越南，老挝，缅甸等国家，中国境内分布较少；麝香石斛有着较浓的香味，花紫红，花瓣质地较厚，茎短且粗壮，唇瓣上的绒毛感较强，开花比春石斛稍晚一些，具有较高的观赏价值。

目前国内市场上流通的麝香石斛主要靠从越南、老挝、缅甸等国家进口，尚无人工栽培，母本较少，种源稀缺；一般通过分株繁殖和扦插的方式进行繁殖，繁殖种苗较少，繁殖率低，生长周期较长，正常生长环境下不经人工授粉结果的几率较小；由于果夹少，果粉细小，在自然环境下不易萌发生长等诸多因素的制约，使得具有高观赏价值的麝香石斛种苗繁育受阻。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种麝香石斛组培扩繁育苗的方法。该组培扩繁育苗方法能够有效的提高麝香石斛种苗的繁育的速度及繁育数量，从母本源头控制种质的稳定性，保证种苗质量，实现麝香石斛优质种子种苗的工厂化生产，满足生产需求，缓解资源稀缺的现况。

本发明的目的采用如下技术方案实现：一种麝香石斛组培扩繁育苗的方法，包括，

外植体选择的步骤：选择健康的麝香石斛2-4年的母本植株；在春季麝香石斛开花期间对石斛进行人工授粉，让其长出果荚，经过3-4个月精心培育，待果荚成熟时，将其采摘放至冰箱在3-7℃的环境下保存2周；

外植体消毒的步骤：取出果荚，将果荚用洗洁精或洗衣粉水浸泡15-20min，用毛刷刷净种壳表面，并用自来水冲洗10-15min；将其放到洁净烧杯，移至接种室，在无菌环境下用医用酒精浸泡，浸泡期间用镊子不断搅拌使其消毒彻底，无菌水冲洗3-4次；再用次氯酸钠消毒外壳，无菌水冲洗3-4次；最后用升汞消毒，无菌水冲洗4-5次，放到超净工作台上的无菌盘里备用；

播种的步骤：将消毒好的果夹用解剖刀和镊子解剖开露出黄色果粉，将果粉撒到1/2MS培养基上，消毒瓶盖后封好盖子，转到培养室中进行培养，培养30-45天种子开始萌发；

继代培养的步骤：萌发的麝香种子在光照强度为1500-2000lx，光照时间为10-12小时/天的条件下生长60天，麝香种苗长到2-3cm高，形成一级母瓶，此时将瓶苗在无菌环境下转到1/2MS培养基中培养60天，长至5-6cm时称为二级母瓶；

生根培养的步骤：将生长60天的二级母瓶在无菌环境下转至MS培养基中生根培养90天；

炼苗、驯化移栽的步骤：生根瓶苗在培养室培养90天，生根良好，苗粗壮，将其移到室外环境中放置15-30天，让其适应外界环境；打开瓶盖放置3-5天，将苗倒出洗净培养基，用杀菌剂浸泡麝香石斛苗根部15-20min，洗净阴干水分，将其移栽到基质中进行驯化。

进一步地，在外植体选择的步骤中，选择3年生的麝香石斛为母本植株最佳；所述果荚成熟时以外种壳黄绿色，完好无裂为准。

进一步地，在外植体消毒的步骤中，所述医用酒精的体积浓度为75％，浸泡时间为30-60s；所述次氯酸钠的体积浓度为2％，消毒时间为1-2min；所述升汞的质量浓度为0.1％，消毒时间为6-8min。

进一步地，在播种的步骤中，所述解剖刀和镊子需要经286℃高消毒并冷却。