[发明专利]一种抑制胃癌细胞MGC-803的靶点及其应用

说明书

本发明属生物医药技术领域，提供一种抑制胃癌细胞MGC‑803的靶点，ARL8B基因和/或其参与的自噬途径。ARL8B基因和/或其参与的自噬途径的抑制剂包括：抗ARL8B的抗体、针对ARL8B编码序列的RNA干扰分子或反义寡核苷酸、ARL8B介导的自噬途径抑制剂。RNA干扰分子为定向干扰MGC‑803细胞中ARL8B基因表达的siRNA分子。可以靶向干扰MGC‑803中ARL8B基因的表达，抑制胃癌细胞生长，促进细胞自噬水平。对开发新的抗胃癌药物具有重要指导作用，用于开发制备抗肿瘤药物，对胃癌的治疗有重大应用前景。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种抑制胃癌细胞MGC-803的靶点及其应用，抑制ARL8B基因的表达，诱导抑制MGC-803的增殖。

背景技术

ARL8B(全称ADP-ribosylation factor like protein 8B；也被命名为ARL10C或Gie1)是与溶酶体结合来调控细胞自噬的小G蛋白，和另一个小G蛋白ARL8A (全称ADP-ribosylation factor like protein 8A；也被命名为ARL10B或Gie2)的结构高度相似，正常生理条件下，在全身各器官内这两个蛋白都有表达，在已知的大多数肿瘤细胞内这两个蛋白质也都有表达。2011年《Nature Cell Biology》杂志报道了Hela细胞内ARL8A和ARL8B的功能，当细胞处于营养充足的环境中，二者呈现一定的表达水平，促使溶酶体迁移到细胞外周，细胞处于低自噬状态。当Hela细胞处于营养缺乏的培养环境中，二者的表达量显著降低，此时溶酶体迁移到细胞中央发挥自噬功能，细胞处于高自噬水平。这篇文献证明了ARL8A和ARL8B是Hela细胞抵抗饥饿诱导自噬过程中调控溶酶体迁移的关键酶，二者的功能相同。2016年《Oncotarget》杂志报道在前列腺癌细胞内ARL8A几乎无表达，可认为是ARL8B单独表达型，降低ARL8B表达量会促进大鼠前列腺癌细胞凋亡，证明ARL8B是一个抗肿瘤药物靶点。从已知的ARL8A和ARL8B的表达量差异来看，肿瘤细胞应该可以分为ARL8B单独表达型、ARL8A单独表达型和二者共有型，也可能存在两种蛋白都没有表达的肿瘤细胞。迄今为止尚无ARL8A单独表达或二者都没有表达的肿瘤细胞被报道。为了寻找ARL8B单独表达的其它肿瘤细胞，我们利用了荧光定量PCR法测定了一些肿瘤细胞内ARL8A和ARL8B的相对表达量，发现了另一株ARL8B单独表达的肿瘤细胞株：胃癌细胞（MGC-803）。

胃癌是起源于胃黏膜上皮的恶性肿瘤，在我国发病率很高，其死亡率占恶性肿瘤的第一位，吸烟、饮食等不良生活习惯，以及幽门螺杆菌的持续感染等是造成胃癌高发的主要原因。胃癌的治疗主要有手术，放射治疗、化疗和中医药真情散治疗。人胃癌细胞MGC-803是从一位53岁男性原发性胃低分化粘液样腺癌患者建立的，该细胞贴壁生长，呈上皮细胞样，是研究胃癌的常用细胞株。

RNA干扰(RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。由于使用RNAi技术可以特异性干扰特定基因的表达，所以该技术被广泛用于探索基因功能及肿瘤基因的治疗领域。

发明内容

本发明的目的之一是提供了一种抑制胃癌细胞MGC-803的靶点，所述靶点为ARL8B基因和/或其参与的自噬途径。

本发明的另一目的是提供了一种ARL8B基因和/或其参与的自噬途径的抑制剂在降低和/或消除胃癌细胞MGC-803药物中的应用。

作为优选方案，所述ARL8B基因和/或其参与的自噬途径的抑制剂包括：抗ARL8B的抗体、针对ARL8B编码序列的RNA干扰分子或反义寡核苷酸、ARL8B介导的自噬途径抑制剂。

作为另一优选方案，所述的针对ARL8B编码序列的RNA干扰分子为定向干扰MGC-803细胞中ARL8B基因表达的siRNA分子。