[发明专利]一种矩阵型试纸条的开发和应用

说明书

本发明公开了一种矩阵型试纸条及其应用。试纸条包括样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)和底板(7)；所述反应膜上具有包被有目标物半抗原‑载体蛋白偶联物的抗原(或抗体)矩阵点(5)和包被有羊抗兔多抗的质控矩阵点(6)，所述结合物释放垫(2)喷涂有抗体(或抗原)‑胶体金复合物。本发明所提供的试纸条能够同时检测6个及以上的项目，具有操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低等特点，适合大量样本的筛查和现场监控。

技术领域

本发明涉及胶体金免疫层析技术，具体涉及一种矩阵型试纸条，可定量检测目标物含量。

背景技术

胶体金试纸条是在现阶段一种重要的快速检测手段，因为其简单、快捷、便于随时随地检测使用的特点而被应用于各种类型的检测工作中。其主要的原理利用抗原抗体的特异性识别结合，传统的胶体金试纸条是将特异性的抗原(抗体)利用划膜仪以条带的形式固定在硝酸纤维素(NC)膜上，当金标抗体(或抗原)通过毛细作用运动到NC膜上，与固定的抗原(抗体)结合，在膜上呈现红色反应线。

目前胶体金试纸条产品因为其技术原因在使用中也存在一些问题，其中最主要的问题之一是缺乏单一试纸条对应检测多个项目。大多数试纸条检测产品均为单项目检测，即一个试纸条只能对应检测一种待测目标物；而现有的多项目的胶体金试纸条产品检测项目最多也只能形成1条质控线和4条检测线组合形式，也就是说现有试纸条产品最多只能一次检测4种待测目标物。

被检测项目数量被限制的主要因素是，由于现有的划膜仪所划的两条线之间的距离至少为4-5mm，随着项目数量的增加，必然导致NC膜的宽度增大和试纸条层析路程的延长。具体来说，一般普通商品化NC膜宽度为25mm，随着要求宽度的提高，NC膜的价格也会越高，提高了试纸条成本价格；另一方面，液体的层析高度也有一定极限，成为增多检测项目的重要限制因素，多项目试纸条反应时必然遇到层析反应时间过长及层析高度不够的问题；此外，当NC膜上有多条条带时，下层条带会对上层条带的显色产生抑制，导致越往上颜色越浅的问题。以上三个限制因素均导致了胶体金多项目检测试纸条的进一步降低成本和大规模应用。

发明内容

本发明的目的是提供两种能够同时检测6个以上(含6个)项目的矩阵型试纸条的设计方案。

本发明所提供的一种矩阵型试纸条，其中金标垫法包括样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)和底板(7)；所述反应膜上具有包被有目标物半抗原-载体蛋白偶联物的抗原(或抗体)矩阵点(5)和包被有羊抗兔多抗的质控矩阵点(6)，所述结合物释放垫(2)喷涂有抗体(或抗原)-胶体金复合物。

所述目标物半抗原-载体蛋白偶联物是由目标物半抗原与载体蛋白偶联得到，所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白、人血清白蛋白等等。

所述目标物单克隆抗体是以目标物半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得，是由目标物单克隆抗体杂交瘤细胞株分泌获得；所述羊抗兔抗体是将兔的免疫球蛋白注射免疫羊得到。

所述样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)依次粘贴在底板(7)上，所述结合物释放垫1/3～1/4被覆盖于样品吸收垫下。

所述底板为PVC底板或其他硬质不吸水的材料；所述样品吸收垫为吸滤纸或滤油纸；所述结合物释放垫为玻璃棉或聚酯材料；所述吸水垫为吸水纸；所述反应膜为硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜。

冻干金法与金标垫法相比不需要结合物释放垫，而另外需要制备冻干金微孔，即包括样品吸收垫(1)、反应膜(3)、吸水垫(4)、底板(7)以及冻干金微孔；所述反应膜上具有包被有目标物半抗原-载体蛋白偶联物的抗原矩阵点(5)和包被有羊抗兔抗体的质控矩阵点(6)，含有抗体(或抗原)-胶体金复合物的冻干金微孔。

本发明的第二个目的是提供制备上述试纸条的方法，其包括步骤：

1.金标垫法