[发明专利]利用DART-MS法快速测定尿液中3-羟基-3-甲基戊二酸的方法在审
| 申请号： | 201711421144.4 | 申请日： | 2017-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN108152415A | 公开（公告）日： | 2018-06-12 |
| 发明（设计）人： | 黄忠平;黄小丽;王丽丽;刘颜姝娴;李国华;刘会君 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;朱思兰 |
| 地址： | 310014 浙江省杭州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 尿液 甲基戊二酸 快速测定 羟基 检测技术 色谱分离 有机酸 应用 分析 | ||
1.一种利用DART-MS法快速测定尿液中3-羟基-3-甲基戊二酸含量的方法，其特征在于，所述方法为：
(1)绘制标准曲线
称取3-羟基-3-甲基戊二酸标准品，用超纯水配制成浓度范围在0.05～5mg/L梯度浓度的标准溶液，将所得标准溶液进行前处理，之后进样进行DART-MS法测定，得到标准溶液质谱图，以3-羟基-3甲基戊二酸m/z 161的特征峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线，进而计算得到标准曲线方程；
所述标准溶液的前处理方法为：将所述标准溶液与乙腈等体积混匀，离心，弃去沉淀，用浓盐酸调节pH至1.0，加入乙酸乙酯，所述乙酸乙酯的用量为标准溶液体积的3倍，混匀，离心，取上清液，残余物质重复进行加入乙酸乙酯混匀、离心、取上清液的操作步骤，重复两次，合并每次所得上清液，氮吹吹干，用体积比1：1的甲醇/水溶液复溶，所述甲醇/水溶液的用量为标准溶液体积的5％，即完成前处理；
所述DART-MS法的测定条件为：
DART条件：负离子模式采集数据，气体温度为400℃，采用Dip-it进样方式进样，载样器滑动速度为0.5mm/s，离子化气体为高纯氦气，待机气体为高纯氮气；
MS条件：扫描方式为Full Scan，扫描范围m/z 50-200，sim模式下m/z 161，锥孔电压为15V；
进样采用25μL进样针，进样量2μL；
(2)试样检测
取尿液试样，进行前处理，之后在步骤(1)DART-MS法的测定条件下，测得试样质谱图，将试样质谱图中3-羟基-3甲基戊二酸m/z 161的特征峰面积代入步骤(1)得到的标准曲线方程中，计算得出尿液试样中3-羟基-3-甲基戊二酸的含量；
所述尿液试样的前处理方法为：将尿液试样用超纯水稀释至原体积的20倍，得到稀释液，将所得稀释液与与乙腈等体积混匀，离心，弃去沉淀，用浓盐酸调节pH至1.0，加入乙酸乙酯，所述乙酸乙酯的用量为稀释液体积的3倍，混匀，离心，取上清液，残余物质重复进行加入乙酸乙酯混匀、离心、取上清液的操作步骤，重复两次，合并每次所得上清液，氮吹吹干，用体积比1：1的甲醇/水溶液复溶，所述甲醇/水溶液的用量为稀释液体积的5％，即完成前处理。
2.如权利要求1所述利用DART-MS法快速测定尿液中3-羟基-3-甲基戊二酸含量的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述梯度浓度的标准溶液的配制方法为：称取3-羟基-3-甲基戊二酸标准品，用超纯水配制成100mg/L的溶液，再逐级稀释成5、2.5、1、0.5、0.05mg/L的标准溶液。
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