[发明专利]一种从银杏叶中提取的银杏内酯化合物及其制备方法

说明书

本发明涉及一种从银杏叶中提取的银杏内酯化合物及其制备方法，本发明以银杏叶为原料，提取得到的银杏叶提取物通过有机溶剂萃取，再经过RP‑18柱色谱分离纯化得到。所述银杏内酯化合物命名为银杏内酯HK，其结构式为：经HPLC‑ELSD检测，纯度≥99％。本发明为首次从银杏叶中提取分离纯化得到银杏内酯化合物。本发明产品可以作为制药的有效成分或制备保健品广泛应用，对于开发新型银杏内酯制剂具有较大应用价值。本发明提供的制备方法操作简单，经济实用，适于工业化生产。

技术领域

本发明涉及中药，具体涉及中药的化学成分单体和提取分离纯化方法，尤其涉及一种从银杏叶中提取的银杏内酯化合物及其制备方法。

背景技术

银杏叶提取物作为制药的有效成分已被广泛应用。目前从银杏中分离得到的有效成分主要是二萜内酯及倍半萜内酯，即银杏内酯 A、B、C、J、M和白果内酯。20世纪80年代以来，研究发现银杏内酯是血小板活化因子(PAF)的强拮抗剂，被认为是最有临床应用前景的天然PAF受体拮抗剂，对于缺血损伤和中枢神经系统具有保护作用，对于心脑血管疾病具有显著疗效。本发明人在进一步研究银杏叶提取物时惊喜地发现，在制备银杏总内酯的过程中，提取分离到一个未知成分，其含量在0.1～0.8％之间，因此，本发明对该未知成分进行了提取分离纯化，并进行结构鉴定，鉴定结果与参考文献(Weinges K,Rummler M,SchickH.Herstellung von 1,10- Dihydroxy-und 1,7,10-Trihydroxyginkgolid aus 1,3,7,10- Tetrahydroxyginkgolid.Liebigs Ann Chem.1993,1023-1027.)进行对比分析，最终确定该化合物为1,10-dihydroxyginkgolid(1,10-二羟基银杏内酯)。现有文献仅报道了从银杏叶中提取和鉴定主要內酯成分，如银杏内酯A、B、C及白果内酯等，而未见有文献报道从银杏叶中提取和鉴定该未知成分的研究，因而进一步研究具有积极意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于从银杏叶中提取和鉴定所述银杏叶提取物中的未知成分。

本发明提供了一种从银杏叶中提取的银杏内酯化合物。

所述银杏内酯化合物通过波谱和质谱等对其结构进行了鉴定归属，确定其化学结构为1,10-二羟基银杏内酯(1,10- Dihydroxyginkgolid)，本发明将其命名为银杏内酯HK(Ginkgolide HK，简称GHK)，其结构式为：

银杏内酯HK化合物的质谱(MS)检测：仪器为Agilent LCMSD 液质联用仪；测试条件为：ESI:0.4ml/min；SCAN:m/z100～1000， Positive mode；银杏内酯HK质谱(MS)结果显示分子量为408。

银杏内酯HK确证与化合物1,10-二羟基银杏内酯一致。

银杏内酯HK化合物的旋光色谱(ORD))检测：仪器为RUDOLPH Autopol IV旋光仪；测试条件：样品浓度为1mg/mL的乙腈溶液， 25℃；测试结果为[ɑ]D25:-68°(c,0.1,Acetonitril)。

银杏内酯HK确证与化合物1,10-二羟基银杏内酯一致。

银杏内酯HK化合物的1H-核磁共振和13C-核磁共振检测：仪器为Bruker 600MHz核磁共振仪，溶剂为DMSO-d6，其碳氢核磁共振数据见表一。

表一.本发明的银杏内酯化合物(银杏内酯HK化合物)和化合物 1,10-二羟基银杏内酯(1,10-dihydroxyginkgolid)碳氢核磁共振数据比较

(DMSO-d₆in 600MHz)