[发明专利]海洋真菌HK1-6中azaphilones类化合物及其作为抗MRSA药物的应用

权利要求书

1.一种海洋真菌来源的azaphilones类化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于所述azaphilones类化合物具有化合物1–4所示的结构：

2.权利要求1所述的化合物1–4或其药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)先在菌种培养基中对海洋真菌Penicillium sp.HK1-6进行菌种培养；

(2)再在发酵培养基中对步骤(1)中的海洋真菌Penicillium sp.HK1-6进行发酵培养；

(3)将步骤(2)得到的发酵物中的发酵液和菌体分离，发酵液用有机溶剂A萃取1～5次，合并萃取液后减压浓缩得到发酵液浸膏；菌体用有机溶剂B浸提1～5次，合并浸提液后减压浓缩得到菌体浸膏；合并发酵液浸膏和菌体浸膏后，经过减压硅胶柱层析，洗脱剂依次采用石油醚：乙酸乙酯＝100:0至0:100、氯仿：甲醇＝100:0至0:100的梯度进行洗脱，并将其按照极性大小分成10个组分Fr.1～Fr.10；

(4)组分Fr.4先经Sephadex LH-20凝胶柱层析，洗脱剂为CHCl₃:MeOH＝1:1，再经ODS反相硅胶柱层析，洗脱剂为MeOH:H₂O＝85:15，最后得到化合物4；组分Fr.5先经正相硅胶柱层析，洗脱剂为乙酸乙酯：石油醚＝1:6至1:3或者甲醇：二氯甲烷＝1:30至1:15，再经高效液相色谱HPLC制备，得化合物2；组分Fr.8先经Sephadex LH-20凝胶柱层析，洗脱剂为CHCl₃:MeOH＝1:1，再经ODS反相硅胶柱层析，洗脱剂MeOH:H₂O＝75:25，最后经高效液相色谱HPLC制备，分别得到化合物1和3；

所述菌种培养基中包含如下成分：葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、琼脂、粗海盐、水；所述发酵培养基中包含如下成分：葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、粗海盐、水；所述的有机溶剂A选自乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿或乙醚中的一种或几种；所述的有机溶剂B选自甲醇、乙醇、THF或丙酮中的一种或几种；

所述海洋真菌Penicillium sp.HK1-6的菌种保藏信息：保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2016年7月5日；保藏编号：CGMCC No.12762；分类命名：青霉Penicillium sp.。

3.权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述的菌种培养基含有葡萄糖0.1％–10.0％、酵母膏0.01％–5％、蛋白胨0.01％–5％、琼脂0.1％–6.0％、粗海盐0.05％–10％，适量的水；上述百分比均为重量百分比；培养温度为0–45℃；培养时间为2–10天；所述的发酵培养基含有葡萄糖0.1％–10.0％、酵母膏0.01％–5％、蛋白胨0.01％–5％、粗海盐0.05％–10％，适量的水；上述百分比均为重量百分比；培养温度为0–45℃；培养时间为20–40天。

4.权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述的高效液相色谱HPLC制备的色谱条件为：色谱柱为Agilent C18,9.4×250mm，7μm，流速为2mL/min，流动相为MeOH:H₂O＝85:15。

5.一种抗耐药菌药物，其特征在于包含权利要求1所述的化合物1–4或其药学上可接受的盐作为活性成分。

6.权利要求5所述的抗耐药菌药物，其特征在于所述耐药菌选自耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌和耐万古霉素的粪肠球菌。

7.权利要求1所述的化合物1–4或其药学上可接受的盐在制备抗耐药菌药物中的应用。

8.权利要求1所述的化合物1–4或其药学上可接受的盐在制备抗耐药菌药物先导化合物中的应用。

9.权利要求7-8任一项所述的应用，其特征在于所述耐药菌选自耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌和耐万古霉素的粪肠球菌。