[发明专利]一种单细胞全基因组扩增试剂盒

权利要求书

1.一种单细胞全基因组扩增试剂盒，所述试剂盒包括：细胞裂解液、细胞裂解酶、磁珠、校正酶、反应终止液、预扩增缓冲液、终扩增缓冲液。

2.如权利要求1所述的一种单细胞全基因组扩增试剂盒，其特征在于，所述细胞裂解液包括但不限于以下任一种：50mM KAc、20mM Tris-Ac、10mM MgAc、0.2％Trition X-100；1xPBS、1xThermo polbuffer、30mM Tris-HCl；10mM Tris-HCl、25mM EDTA、100mM NaCl；0.5％SDS、10mM Tris-HCl、50mM KCl；10mM Tris-HCl、100mM EDTA、0.5％SDS；30mM Tris-HCl、10mM EDTA、1％SDS；30mM Tris-HCl、2mM KCl、0.2％Triton X-100。

3.如权利要求1所述的一种单细胞全基因组扩增试剂盒，其特征在于，所述校正酶为具有DNA糖基化酶活性的酶。

4.如权利要求1所述的一种单细胞全基因组扩增试剂盒，其特征在于，所述校正酶包括但不限于以下一种或几种：UDG酶、核酸外切酶Ⅷ、单链选择性尿嘧啶-DNA糖基化酶、TU错配DNA糖基化酶、具有甲基结合域的尿嘧啶-DNA糖基化酶。

5.如权利要求1所述的一种单细胞全基因组扩增试剂盒，其特征在于，所述反应终止液包括：尿嘧啶-糖基化酶抑制剂。

6.如权利要求1所述的一种单细胞全基因组扩增试剂盒，其特征在于，所述预扩增缓冲液包括DNA聚合酶、BSA、dNTP、DNA聚合酶、无核酸水、第一随机引物。

7.如权利要求6所述的一种单细胞全基因组扩增试剂盒，其特征在于，所述第一随机引物结构为：第一引物固定序列-第一引物随机序列-第一引物三联重复序列，其中所述第一引物固定序列如SEQ ID NO：1所示，具体为ATGACTGATCCTTGTGCTAGAGTGTAC。

8.如权利要求7所述的一种单细胞全基因组扩增试剂盒，其特征在于，所述第一引物随机序列长度为4～20nt，优选地为4～10nt，更优选地为6～8nt。

9.如权利要求1所述的一种单细胞全基因组扩增试剂盒，其特征在于，所述终扩增缓冲液包括DNA聚合酶、BSA、dNTP、DNA聚合酶、无核酸水、第二随机引物。

10.如权利要求9所述的一种单细胞全基因组扩增试剂盒，其特征在于，所述第二随机引物结构为：第二引物固定序列-第二引物随机序列-第二引物三联重复序列，其中所述第二引物固定序列如SEQ ID NO：2所示，具为:ATGACTGATCCTTGTGCTAGAGTGTAC。

11.如权利要求10所述的一种单细胞全基因组扩增试剂盒，其特征在于，所述第二引物随机序列长度为4～20nt，优选地为4～10nt，更优选地为6～8nt。

12.如权利要求7或10所述的一种单细胞全基因组扩增试剂盒，其特征在于，所述第一引物中的三联重复序列为TTT，则所述第二引物中的三联重复序列GGG；所述第一引物中的三联重复序列为AAA，则所述第二引物中的三联重复序列

GGG；所述第一引物中的三联重复序列为TTT，则所述第二引物中的三联重复序列CCC；所述第一引物中的三联重复序列为AAA，则所述第二引物中的三联重复序列CCC。

13.如权利要求6或9所述的一种单细胞全基因组扩增试剂盒，其特征在于，所述DNA聚合酶包括但不限于以下一种或几种：vent DNA聚合酶、T7 DNA聚合酶、Bsu DNA聚合酶，大片段、T4 DNA聚合酶、DNA聚合酶I、(Klenow)大片段、DNA聚合酶I(E.coli)、Therminator^TMDNA聚合酶、Sulfolobus DNA聚合酶IV、phi29 DNA聚合酶、Bst2.0DNA聚合酶、Bst2.0 DNA聚合酶、Bst DNA聚合酶，全长、Bst DNA聚合酶、Deep VentR^TMDNA聚合酶、VentR(exo–)DNA聚合酶、DNA聚合酶、热启动Taq DNA聚合酶、热启动Taq DNA聚合酶、Taq DNA聚合酶、热启动Taq DNA聚合酶、Taq DNA聚合酶大片段、Taq DNA聚合酶(提供不含镁离子的ThermoPol II缓冲液)、Taq DNA聚合酶(提供缓冲液)、热启动DNA聚合酶、DNA聚合酶、热启动Flex DNA聚合酶、超保真DNA聚合酶、热启动超保真DNA聚合酶、超保真DNA聚合酶、KAPA HiFi Uracil+ReadyMix(2x)、PfuTurbo Cx热启动DNA聚合酶。