[发明专利]Gal4温敏型突变体、重组表达载体、温度调控系统及其应用

权利要求书

1.Gal4温敏型突变体，其特征在于：所述突变体的氨基酸序列选自以下序列：

序列表中SEQ ID NO:6的氨基酸序列；

序列表中SEQ ID NO:7的氨基酸序列；

序列表中SEQ ID NO:8的氨基酸序列；

序列表中SEQ ID NO:9的氨基酸序列；

序列表中SEQ ID NO:10的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的Gal4温敏型突变体，其特征在于，编码Gal4温敏型突变体的核苷酸序列选自下列序列：

SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；

SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列；

SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列；

SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列；

SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列。

3.重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包含权利要求2所述的核苷酸序列。

4.基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌由权利要求3所述的重组表达载体转化至宿主微生物中获得。

5.利用如权利要求1所述的Gal4温敏型突变体在酿酒酵母中构建温度调控系统的方法，其特征在于，首先敲除酿酒酵母染色体上GAL80基因，使GAL系统不再受半乳糖控制，进一步用HIS3标签敲除GAL4基因；然后将权利要求3所述的重组表达载体整合到酵母染色体中，构建温度敏感的GAL系统。

6.Gal4温敏型突变体在酿酒酵母中构建的温度调控系统，其特征在于，所述系统采用权利要求5的方法构建。

7.如权利要求6所述的Gal4温敏型突变体在酿酒酵母中构建的温度调控系统在类胡萝卜素合成中的应用。

8.根据权利要求7所述的Gal4温敏型突变体在酿酒酵母中构建的温度调控系统在类胡萝卜素合成中的应用，其特征在于，将类胡萝卜素合成途径中的基因置于GAL1-GAL10启动子后，构建产类胡萝卜素的酿酒酵母工程菌株，实现产类胡萝卜素的工程菌株的生长阶段和产物合成阶段的分阶段调控。

9.根据权利要求8所述的Gal4温敏型突变体在酿酒酵母中构建的温度调控系统在类胡萝卜素合成中的应用，其特征在于，所述类胡萝卜素为虾青素或番茄红素。