[发明专利]片仔癀及其制剂在制备抗肿瘤转移药物中的应用

说明书

本申请是申请日为2014年8月20日、申请号为201410411675.5、发明创造名称为片仔癀及其制剂在制备抗肿瘤转移药物中的应用的专利申请的分案申请。

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种片仔癀及其制剂在制备抗肿瘤转移药物中的新用途。

背景技术

大多数肿瘤治疗失败的原因是因为均发生了不同程度和不同部位的肿瘤转移，60％以上肿瘤患者于初次就诊时已发现有肿瘤转移，这个肿瘤的治疗和治愈都造成了极大的困难。癌症患者经手术治疗、放化疗等综合治疗，可有效遏制主要部位肿瘤的发展，但无法遏制恶性肿瘤易发生转移的特性。肿瘤转移的机制是极为复杂的，至今仍有许多问题尚不清楚，给肿瘤的防治均带来极大困难。

中医认为肿瘤的发病机制为“毒、瘀、虚”的动态变化过程，其中毒、瘀在疾病发展中占主导地位，是预防及治疗肿瘤的关键。片仔癀是由牛黄、三七、蛇胆、麝香等多种名贵中药精制而成的锭剂，气微香，味苦、微甘，其清热解毒、活血化瘀、消肿止痛、祛邪扶正的功效臻于上乘，充分体现了中医治疗肿瘤的优势。

发明内容

为此，本发明所要解决的技术问题在于提供了片仔癀及其制剂的药物新用途。

本发明公开了片仔癀及其制剂在制备抗肿瘤转移药物中的新用途。

所述肿瘤包括肺癌、肝癌、胃癌或宫颈癌肿瘤。

所述抗肿瘤转移是指抑制肿瘤细胞与纤维连接蛋白的粘附。

所述抗肿瘤转移是指抑制肿瘤细胞侵袭的能力。

所述抗肿瘤转移是指抑制肿瘤血管的生成。

所述片仔癀选择性加入常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的制剂。

所述制剂包括锭剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、酊剂、酒剂、煎膏剂或合剂。

所述片仔癀及其制剂日服用制剂量含片仔癀0.6-1.8g。

本发明所述方案的药物新用途在现有片仔癀制剂的基础上，开发出其与原有疗效不同的新的治疗用途，发现现有片仔癀可用于制备抗肿瘤转移药物中的新用途，尤其是抗肺癌、肝癌、胃癌、宫颈癌肿瘤的转移功效。实验证明片仔癀及其制剂可显著的抑制肺癌、肝癌、胃癌、宫颈癌的肿瘤细胞与纤维连接蛋白的粘附、抑制肿瘤细胞侵袭的能力、抑制肿瘤血管的生成。不仅为现有片仔癀制剂的利用开发出新的用途，同时也为癌症病机复杂、治疗效果欠佳的疾病开辟了一种新的中药治疗方法，不仅有效率高且副作用低。

实验例

(一)片仔癀对肿瘤细胞粘附能力影响的研究

1.目的与原理

通过研究片仔癀对肿瘤细胞粘附能力的影响，考察片仔癀的抗肿瘤转移作用。细胞的粘附性在维持细胞外形、调节细胞分裂、运动的等功能中起十分重要的作用。肿瘤细胞通过表面受体粘附于基底膜及细胞外基质成分上。粘附是癌细胞侵袭的始动步骤。高侵袭的肿瘤细胞与基底膜成分的异质性粘附能力通常增高，而肿瘤细胞间的同质性粘附能力会下降。上述特性有利于肿瘤细胞与肿瘤母体分离，并侵犯基底膜等正常组织。通过检测肿瘤细胞和细胞外基质蛋白(纤维粘连蛋白)的黏附率，检测片仔癀抗肿瘤细胞黏附的能力，粘附率越低，说明片仔癀抗肿瘤粘附能力越强。

2主要试剂

人工重构基底膜材料Matrigel(主要成分为层粘蛋白和IV型胶原)、纤维连接蛋白(FN)、小牛血清白蛋白BSA、噻唑蓝MTT。

3实验步骤

(1)包被基底膜：用不含血清的空白培养基配制浓度为10μg/ml的FN，以50μl/孔分别加入96孔培养板，4℃过夜包被。

(2)水化基底膜：吸出培养板中的残余液体，每孔加入50μl含10mg/mlBSA的无血清培养基，37℃，30min。吸出残余液体，用PBS洗两遍。

(3)接种细胞：用胰酶消化肿瘤细胞，用不同浓度的药液稀释细胞，调整细胞密度为105个/ml,分别将100μl细胞悬液接种于培养板中，每个浓度设5个平行样本。

(4)培养细胞：37℃，5％CO₂条件下培养细胞3h。

(5)检测：培养结束后，吸出培养板中的液体，加入PBS轻轻洗一遍，洗去未黏附的细胞，然后用MTT比色法测定，测定波长570nm，参比波长650nm，在酶联免疫检测仪上测定各孔光吸收值。

(6)实验数据统计：黏附抑制率＝(1-给药组A值/空白组A值)×100％。

4结果与讨论