[发明专利]一种余甘子组织培养的方法

说明书

本发明涉及植物组织培养技术领域，提供了一种余甘子组织培养的方法，将余甘子半木质化枝条作为外植体，依次进行诱导培养、增殖培养和生根培养，得到的生根苗经炼苗移栽后，得到余甘子组培苗。本发明的生根培养基以1/2MS培养基为基准，包括NAA 0.2～0.8mg/L，KT 0.1～0.6mg/L，含铈可溶性化合物0.1～0.2mM，琼脂8～11g/L和蔗糖25～35g/L。本发明的生根培养基能够促进芽苗根系的形成和生长，生根率能够达到80％～85％，有效的解决了生产中余甘子组培繁殖过程中生根率低的限制。

技术领域

本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种余甘子组织培养的方法。

背景技术

余甘子(Phyllanthus emblica L.)为大戟科(Euphorbiaceae)，叶下珠属(Phyllanthus)，落叶小乔木或灌木。在我国主要分布于南亚热带地区。余甘子果可生食、渍制或榨取果汁，果具清热解毒、降血压、防治肝胆病、收敛止泻作用，是重要的中药材和制药原料，同时树皮为重要的栲胶原料。余甘子在干热河谷、石质山地等生态脆弱区已作为优良的生态经济兼用造林树种。

我国余甘子良种化起步晚，虽然只有少数地区开始采用良种，但发展势头很快。近几年引进的国外品种已表现出较好的适应性和生长特性。进行品种苗的无性繁殖，是果用品种生产的最好方法。目前，余甘子良种苗木多采用嫁接方法进行无性繁殖，扦插等无性繁殖方法并没有成功。余甘子离体繁殖的研究国内外甚少，仅限于印度Sehgal-CB对余甘子胚乳再生三倍体植株的研究。采用对余甘子进行组织培养的方法，可以缩短育种周期，加速优良品种的繁殖和培育。然而，组织培养的余甘子生根率低仍是阻碍余甘子大量繁殖所面临的技术问题。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种余甘子组织培养的方法，提高余甘子的生根率，缩短培育时间，提高繁殖系数。

为了实现上述发明目的，本发明提供了一种余甘子组织培养的方法，包括以下步骤：

(1)将余甘子半木质化枝条插入诱导培养基上进行诱导培养，得到丛生芽；

(2)将步骤(1)得到的丛生芽分割成带有一个侧芽的芽段，每个芽段分别接种于增殖培养基中增殖培养进行增殖培养，得到丛生不定芽；

(3)从步骤(2)得到的丛生不定芽中分离单个不定芽，接种于生根培养基上生根培养，得到生根苗；

所述生根培养基以1/2MS培养基为基准，包括NAA 0.2～0.8mg/L，KT0.1～0.6mg/L，含铈可溶性化合物0.1～0.2mM，琼脂8～11g/L和蔗糖25～35g/L；

(4)将步骤(3)得到的生根苗炼苗后移栽，得到余甘子组培苗。

优选的，所述余甘子半木质化枝条的长度为3～4cm。

优选的，步骤(1)中，所述诱导培养基以MS培养基为基准，包括6-苄氨基腺嘌呤0.5～1.0mg/L、蔗糖25～35g/L、卡拉胶6.5～7.5g/L和聚乙烯吡咯烷酮8～15mg/L。

优选的，步骤(2)中，所述增殖培养基以MS培养基为基准，包括6-苄氨基腺嘌呤0.05～0.2mg/L、萘乙酸0.005～0.02mg/L、蔗糖25～35g/L和卡拉胶6.5～7.5g/L。

优选的，所述含铈可溶性化合物包括硝酸铈、氯化铈或氧化铈。

优选的，所述余甘子组织培养的条件为：培养温度20～30℃、湿度50～60％、光照时间12～16h/d、光照强度为1500～30001x。

优选的，所述生根培养的时间为15～25d。

优选的，步骤(4)中，所述移栽为将带有生根培养基的生根苗一同移栽至育苗基质中。