[发明专利]一种烟草对烟草镰刀菌根腐病抗性的鉴定方法

说明书

本发明公开了一种烟草对烟草镰刀菌根腐病抗性的鉴定方法，包括以下步骤：步骤一、烟草镰刀菌病菌培养；步骤二、菌液的制备；步骤三、烟苗的培育；步骤四、烟苗的前处理；步骤五、接菌；步骤六、调查；最后根据发病情况，即可检测出品种对镰刀菌根腐病的抗性。本发明的鉴定方法具有以下特点，第一，直接利用烟苗鉴定，与移栽到盆内或大田接种病菌相比较，具有以下优点：1、可以省去移栽后盆栽培养烟株繁琐的工作，降低了工作量；漂盘接种，一批可以接种几百‑几千个植株，扩大了接种量；苗期直接接种，还大幅度的缩短鉴定所需的时间。2、使烟草对镰刀菌根腐病的抗性不受生长季节限制，任何季节都能展开鉴定工作等优点。

技术领域

发明涉及烟草病害鉴定技术领域，具体涉及一种烟草对烟草镰刀菌根腐病抗性的鉴定方法。

背景技术

烟草是重要的经济作物，其病害种类很多，以根茎类病害损失最为严重。长期以来烟草根茎类病害以黑胫病发生较多。近年来，随着连作的面积扩大，根茎类病害日益严重，除了黑胫病外，一种新的病害正在蔓延扩展，即镰刀菌根腐病。黑胫病的发生已经引起了高度的关注，所以在品种培育、抗性鉴定、栽培措施、药物防治等手段上，都有深入的研究。镰刀菌根腐病在烟草上发现较晚，其研究主要集中在病原菌的鉴定、分离等方面，病害的鉴定研究很少见到。

镰刀菌属于土壤习居菌，种类繁多，分布很广，可侵染多种植物(粮食作物、经济作物、药用植物及观赏植物)引起植物的根腐、茎腐、花腐和穗腐等。镰刀菌产孢能力很强，孢子传播途径很多，除土传外还可以通过空气传播，侵染植物维管束系统，破坏植物的输导组织。许多研究表明镰刀菌在植物的生长发育过程中还产生毒素，造成植物萎蔫死亡。镰刀菌病害在生产上属于防治最困难的重要病害之一，目前主要采用抗病育种及生物防治方法，但这些方法的使用因条件限制有一定程度的局限性。化学防治只能以预防为主，植物一旦受到侵染其治病效果甚微。只有充分认识到病原菌对植物的作用机理，才能找到最经济、有效、环保的防治措施。

研究认为，在河南省引起烟草枯萎病与根腐病的镰刀菌种类较多，其中茄病镰刀菌(F.oxysporum)和尖孢镰刀菌(F.oxysporum)是引起烟草根腐病和枯萎病的主要致病菌。目前，要培育出抗病品种，首先要对资源材料做抗性鉴定，在鉴定的基础上，再进一步进行机理、分子方面的研究。所以准确快速有效的鉴定是对烟草抗源的挖掘、利用和抗病品种选育的首要环节。

研究认为，在河南省引起烟草枯萎病与根腐病的镰刀菌种类较多，其中茄病镰刀菌(F.oxysporum)和尖孢镰刀菌(F.oxysporum)是引起烟草根腐病和枯萎病的主要致病菌。目前，要培育出抗病品种，首先要对资源材料做抗性鉴定，在鉴定的基础上，再进一步进行机理、分子方面的研究。所以准确快速有效的鉴定是对烟草抗源的挖掘、利用和抗病品种选育的首要环节。

目前的鉴定方法:目前，没有镰刀菌根腐病抗性的鉴定标准，在文献中能找到的是在其它研究种关于该病的接种方法，一种是利用镰刀菌粗毒素经提取纯化后处理刚出芽的烟苗(烟草镰刀菌根腐病病菌致病粗毒素的研究，赵杰)；另一种是利用菌饼接种10叶期的烟苗，在烟苗根茎部用接种针针刺伤口，把制好的菌饼贴于伤口处，用脱脂棉蘸取无菌水包裹在接种处(河南烟草镰刀菌的初步分子鉴定，田艳艳)，这两种方法均能达到使烟株发病的目的，但对品种发病程度起不到鉴定的作用。

发明内容

针对现有烟草镰刀菌根腐病抗性鉴定技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种快速鉴定烟苗对烟草镰刀菌根腐病抗性的方法，可有效地鉴别烟草镰刀菌根腐病。

本发明解决问题的技术方案是：

一种烟草对烟草镰刀菌根腐病抗性的鉴定方法，包括以下步骤：