[发明专利]一种菠萝的组织培养方法

说明书

技术领域

本发明涉及组织培养方法，具体地，涉及一种菠萝的组织培养方法。

背景技术

菠萝：学名凤梨，茎短，叶多数，莲座式排列，剑形，顶端渐尖，全缘或有锐齿，腹面绿色，背面粉绿色，边缘和顶端常带褐红色，生于花序顶部的叶变小，常呈红色。花序于叶丛中抽出，状如松球；苞片基部绿色，上半部淡红色，三角状卵形；萼片宽卵形，肉质，顶端带红色；花瓣长椭圆形，端尖，上部紫红色，下部白色。聚花果肉质。花期夏季至冬季。菠萝为著名热带水果之一，原产美洲热带地区，现在我国福建、广东、海南、广西、云南也有大量栽培。

现有的菠萝的繁殖方式常用的为：播种、分株与芽殖；无论上述何种繁殖方式，均存在成活率低与繁殖效率低的缺陷，进而限制了菠萝栽培。

发明内容

本发明的目的是提供一种菠萝的组织培养方法，该菠萝的组织培养方法具有优异的成活率以及繁殖率。

为了实现上述目的，本发明提供了一种菠萝的组织培养方法，包括：

1）将菠萝的冠芽进行灭菌消毒，接着将冠芽切碎作为外植体，然后将外植体外植体置于基础培养基中进行初次诱导以得到愈伤组织；

2）将愈伤组织置于诱导培养基中进行二次诱导以催生不定芽；

3）将具有不定芽的愈伤组织切块以得到愈伤组织块且愈伤组织块至少具有两个不定芽，接着将愈伤组织块置于增殖培养基中进行增殖培养以得到增殖芽块；

4）将增殖芽块置于生根培养基中进行生根培养以得到组织培养苗；

5）将组织培养苗炼苗；

其中，步骤1）-4）的培养条件均至少符合以下条件：无菌且透气；基础培养基为含有GA（赤霉素）、NAA（1-萘乙酸）和核黄素的MS培养基；诱导培养基为含有CPPU（氯吡苯脲）、蛋白胨、地表球囊菌的MS培养基；增殖培养基为含有青霉素、椰乳、活性炭的MS培养基；生根培养基含有1/2MS培养基。

在上述技术方案中，本发明采取菠萝的冠芽作为外植体，然后依次经过初次诱导、二次诱导、增殖培养、生根培养、炼苗以得到成熟的菠萝，在各个培养工序中采用特定的培养基进而使得得到的菠萝具有优异的成活率和高产率，在此基础上能够大面积的进行培育菠萝，从而为菠萝的推广奠定了坚实的基础。

本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

具体实施方式

以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。

本发明提供了一种菠萝的组织培养方法，包括：

1）将菠萝的冠芽进行灭菌消毒，接着将冠芽切碎作为外植体，然后将外植体外植体置于基础培养基中进行初次诱导以得到愈伤组织；

2）将愈伤组织置于诱导培养基中进行二次诱导以催生不定芽；

3）将具有不定芽的愈伤组织切块以得到愈伤组织块且愈伤组织块至少具有两个不定芽，接着将愈伤组织块置于增殖培养基中进行增殖培养以得到增殖芽块；

4）将增殖芽块置于生根培养基中进行生根培养以得到组织培养苗；

5）将组织培养苗炼苗；

其中，步骤1）-4）的培养条件均至少符合以下条件：无菌且透气；基础培养基为含有GA、NAA和核黄素的MS培养基；诱导培养基为含有CPPU、蛋白胨、地表球囊菌的MS培养基；增殖培养基为含有青霉素、椰乳、活性炭的MS培养基；生根培养基含有1/2MS培养基。

在本发明的基础培养基中，各组分的含量可以在宽的范围内选择，但是为了进一步提高菠萝的成活率和繁殖效率，优选地，在基础培养基中，GA的含量为0.4-0.6mg/L，NAA的含量为0.5-0.7mg/L，核黄素的含量为0.05-0.15mg/L。

在本发明的诱导培养基中，各组分的含量可以在宽的范围内选择，但是为了进一步提高菠萝的成活率和繁殖效率，优选地，在诱导培养基中，CPPU的含量为0.4-0.6mg/L，蛋白胨的含量为1.5-2.5mg/L，地表球囊菌的孢子含量为1300-1400个/L。

在本发明的增殖培养基中，各组分的含量可以在宽的范围内选择，但是为了进一步提高菠萝的成活率和繁殖效率，优选地，在增殖培养基中，青霉素的含量为0.08-0.15mg/L，椰乳的含量为1.5-2mg/L，活性炭的含量为0.5-0.7mg/L。