[发明专利]一种金心也门铁组织培养快速繁殖方法

权利要求书

1.一种金心也门铁Dracaena fragrans cv. massangeana组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：

（1）外植体预处理与消毒：选取金心也门铁Dracaena fragrans cv. massangeana的茎段或侧芽作为外植体，用含有HgCl₂和吐温的消毒液进行消毒，消毒液中HgCl₂的质量体积百分比为0.1%，吐温的体积百分比为0.1-0.6%；

（2）外植体出芽诱导：将经过步骤（1）消毒处理的茎段或侧芽外植体切成带芽生长点的小段接种到诱导培养基上进行侧芽诱导培养，得到新生侧芽，将得到的新生侧芽切下，转接种到新鲜的诱导培养基进行丛芽诱导培养，得到丛生芽团块苗；

（3）快速繁殖：将步骤（2）得到的丛生芽团块苗切成小团块接种于增殖培养基1上进行增殖扩繁培养，当扩繁至5-6代后，将增殖培养基1换为增殖培养基2继续进行增殖扩繁培养，得到扩繁团块苗；

（4）丛生芽壮苗培养：将步骤（3）得到的扩繁团块苗切成小团块接种至壮苗培养基上进行壮苗培养得到壮苗；

（5）生根培养：将步骤（4）得到壮苗切开接种到生根培养基上进行生根诱导培养，得到生根幼苗；

（6）炼苗移栽：将生根幼苗进行炼苗，之后取出幼苗清洗幼苗根部的培养基，用质量浓度10-25%的百菌清洗液清洗1-5min，置于移栽基质中进行移栽培养；

所述步骤（2）使用的诱导培养基为组成为MS培养基+3.0mg/L的6-BA +20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且诱导培养基的pH为5.5-6.8，其中SU是蔗糖的缩写，CAR是卡拉胶的缩写；

所述步骤（3）使用的增殖培养基1为MS培养基+2.0mg/L的6-BA+0.01mg/L的NAA +30g/L的SU+5.5g/L的CAR，且增殖培养基1的pH为5.5-6.8，其中SU是蔗糖的缩写，CAR是卡拉胶的缩写；

在所述步骤（3）中使用的增殖培养基2为MS培养基+0.5mg/L的6-BA +0.01mg/L的NAA +30g/L的SU+5.5g/L的CAR，且增殖培养基2的pH为5.5-6.8，其中SU是蔗糖的缩写，CAR是卡拉胶的缩写；

所述步骤（4）中选用的壮苗培养基可以为以下两种中的任意一种：MS培养基+0-1.0mg/L的6-BA+0.1-1.0mg/L的IAA +20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且壮苗培养基的pH为5.5-6.8；或MS培养基+0.5-2.5g/L的AC+20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且壮苗培养基的pH为5.5-6.8，其中SU是蔗糖的缩写，CAR是卡拉胶的缩写；

所述步骤（5）选用的生根培养基可以为以下两种中的任意一种： MS’培养基+0.1-2.0mg/L的IBA +20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且生根培养基的pH为5.5-6.8；或MS’培养基+0.5-2.0g/L的AC+20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且生根培养基的pH为5.5-6.8，其中SU是蔗糖的缩写，CAR是卡拉胶的缩写,MS’培养基是指将MS培养基中硝酸钾和硝酸铵的量减半。

2.根据权利要求1所述的一种金心也门铁Dracaena fragrans cv. massangeana组织培养快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤（1）中选用的茎段外植体是除去侧芽和凸起的茎段，接种之前将其切成1.0-2.0cm的小段；选用的侧芽外植体直径在0.8-2.5cm之间。

3.根据权利要求1所述的一种金心也门铁Dracaena fragrans cv. massangeana组织培养快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤（1）中先用剪刀剪去茎段上的叶片主体，再在叶片与茎干的交界线上方1-3cm处环割叶片，将叶片彻底除去，之后用含有HgCl₂和吐温的消毒液进行消毒，消毒液中HgCl₂的质量体积百分比为0.1%，吐温的体积百分比为0.1-0.6%。