[发明专利]一种啤酒专用粳稻恢复系的选育方法

权利要求书

1.一种啤酒专用粳稻恢复系的选育方法，其特征在于：所述选育方法包括以下步骤：

1）以整精米率高、短圆粒型、高产粳稻品系为母本，记为品种P1，以糊化温度低的粳稻品系P2，恢复力强、配合力高、直链淀粉含量高、稻米淀粉排列疏松籼稻品系P3，高产、适应性广、耐寒抗稻瘟病粳稻品系P4为父本；作杂交P1/P2、P1/P3和P1/P4，得杂种一代F1-12、F1-13和F1-14；

2）种植杂种一代F1-12、F1-13和F1-14，开花期以F1-12作母本分别与F1-13和F1-14再次杂交，获得复交一代，以F1-123和F1-124表示；

3）种植F1-123和F1-124，开花期分别取幼穗，73wt%酒精消毒，8.2℃下处理4天；超净工作台上剥离幼穗，0.1wt%HgCl2溶液消毒10分钟，无菌水清洗5次，吹干花药表面水分后接种于SK3培养基上诱导愈伤组织，接种量为3000-3200个花药，愈伤组织继代1次后置于N6培养基中进行分化诱导，将获得的分化苗置于含3.3mg/L秋水仙素的生根培养基中诱导生根和加倍培养，长成小苗，最后转移到无激素的MS培养基上生根，长成小植株，再移植到温室里种植，去除单倍和多倍体，保留二倍体植株，成熟后单株收种得DH群体，分别以DH1-1和DH1-2表示；

4）春季播种种植DH1-1和DH1-2，每个群体800-900株，DH1-2在苗期进行稻瘟病和耐寒性鉴定，拔除掉不抗株，保留耐寒抗病的植株；在夏季抽穗成熟，DH1-1群体选择短圆粒型、结实率达88%以上和农艺性状优良的单株收获种子得DH2-1，DH1-2群体选择短圆粒型、结实率达88%以上和农艺性状优良的单株收获种子得DH2-2；

5）实验室内采用小型碾米机对收获的DH2-1、DH2-2单株种子进行加工筛选，从中选择腹白大、粒长﹤5.5mm、糙米率﹥80%和整精米率﹥65%的单株；

6）对5）上选的DH2-1单株稻米进行直链淀粉含量和糊化温度测定，选择直链淀粉含量﹥25%且糊化温度﹤65℃的单株，使用扫描电镜进行稻米淀粉排列疏密鉴定，选择淀粉排列疏松的单株；对5）上选的DH2-2单株稻米进行糊化温度测定，选择糊化温度﹤65℃的单株；

7）播种6）筛选所得DH2-1、DH2-2单株，开花期在DH2-1、DH2-2单株中分别选择株高105-115cm、剑叶直立、穗头较大和花粉散粉好的单株3株，作杂交DH2-1/DH2-2，得杂交F1代株以F1-1234表示；

8）种植F1-1234，开花期取幼穗，73wt%酒精消毒，8.2℃下处理4天，超净工作台上剥离幼穗，0.1wt%HgCl2溶液消毒10分钟，无菌水清洗5次，吹干花药表面水分后接种于SK3培养基上诱导愈伤组织，接种量为3300-3500个花药，愈伤组织继代1次后置于N6培养基中进行分化诱导，将获得的分化苗置于含3.3mg/L秋水仙素的生根培养基中诱导生根和加倍培养，长成小苗，转移到无激素的MS培养基上生根，长成小植株，再移植到温室里种植，去除单倍和多倍体，保留二倍体植株，成熟后单株收种得DH群体，以DH1-1234表示；

9）春季播种种植DH1-1234，群体850-950株，苗期进行稻瘟病和耐寒性鉴定，拔除掉不抗株，保留抗病耐寒的植株；在夏季抽穗成熟，选择短圆粒型、结实率达88%以上和农艺性状优良的粳型株，单株收获种子得DH2-1234；

10）实验室内采用小型碾米机对收获的DH2-1234进行加工筛选，从中选择腹白大、粒长﹤5.5mm、糙米率﹥80%和整精米率﹥65%的单株；上选的单株稻米进行直链淀粉含量和糊化温度测定，选择直链淀粉含量﹥25%且糊化温度﹤65℃的单株，使用扫描电镜进行稻米淀粉排列疏密鉴定，选择淀粉排列疏松的单株；

11）种植10）上选的单株，同时种植测交用不育系，苗期对上选的单株进行稻瘟病和耐寒性鉴定，拔除掉不抗株，保留抗病耐寒的植株；开花期对上选单株进行测交，成熟期选择结实率达85%以上、产量性状好、穗大粒多和叶片转色好的粳型株系，单株收获种子得DH3-1234；

12）株系种植11）上选的DH3-1234单株和测交F1，成熟期调查测交F1结实率和产量性状表现，选择结实率85%以上且产量性状表现好的测交F1对应的DH3-1234株系，从中选择农艺性状和产量性状均表现优异的单株收种，即育成啤酒专用粳稻恢复系。

2.根据权利要求1所述的一种啤酒专用粳稻恢复系的选育方法，其特征在于：所述整精米率高、短圆粒型、高产粳稻品系P1为武粳075；糊化温度低的粳稻品系P2为盐粳2号，恢复力强、配合力高、直链淀粉含量高、稻米淀粉排列疏松籼稻品系P3为泸恢6684或泸恢37，高产、适应性广、耐寒抗稻瘟病粳稻品系P4为丽粳314。