[发明专利]一种高效诱导胚愈伤组织的培养基的筛选配置方法

权利要求书

1.一种高效诱导胚愈伤组织的培养基的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

A.将作物成熟种子去壳并烘干处理；

B.配置多种待筛选的脱分化培养基，并将前述步骤去壳已烘干的作物成熟种子在组培室的超净台上接入培养基内；

C.将已接入成熟种子的培养基密封，放入25-32℃恒温培养室内进行愈伤组织诱导培养；

D.10-18天后将培养室内的培养基取出，统计培养基内的愈伤组织的诱导率和其大小。

2.根据权利要求1所述的高效诱导胚愈伤组织的培养基的筛选方法，其特征在于，所述步骤B进一步包括：

①配置两种愈伤组织脱分化诱导培养基；

②取烘干去壳的作物成熟种子，用75％乙醇进行消毒处理2次；

③清洗后将乙醇倒出，随后加入20％的次氯酸钠浸泡并摇床160rpm震荡30-40min进行消毒；

④浸泡完成之后，倒掉次氯酸钠溶液，并用灭菌过的蒸馏水清洗一次或多次；同时用75％的乙醇清洗超净台，之后接种。

3.根据权利要求2所述的高效诱导胚愈伤组织的培养基的筛选方法，其特征在于，所述子步骤③中，加入的次氯酸钠的浓度为20％，160rpm摇床震荡消毒30-40min。

4.一种高效诱导胚愈伤组织的培养基的配置方法，其特征在于，包括以下步骤：

①.配置N6培养液；

②配置愈伤组织诱导培养基：

吸取60ml-70ml的N6母液放入1L的烧杯内；

随后，加入3ml-5ml的B5溶液和7ml-10ml的B5有机液，再加入1-3g铁盐；

最后，加入20g-40g蔗糖溶液、3-5g脯氨酸、0.1-0.5g谷氨酰胺、0.3g-0.7g水解酪蛋白、20g-50g蔗糖、1mg-10mg生长素2，4-D；

添加8-14g琼脂粉；

本培养基配置过程中不添加植物凝胶。

5.一种高效诱导胚愈伤组织的培养基的配置方法，其特征在于，包括以下步骤：

①.配置N6培养液；

②配置愈伤组织诱导培养基：

吸取60ml-70ml的N6母液放入1L的烧杯内；

随后，加入3ml-5ml的B5溶液和7ml-10ml的B5有机液，再加入1-3g铁盐；

最后，加入20g-40g蔗糖溶液、3-5g脯氨酸、0.1-0.5g谷氨酰胺、0.3g-0.7g水解酪蛋白、20g-50g蔗糖、1mg-10mg生长素2，4-D；

添加8-14g植物凝胶；

本培养基配置过程中不添加琼脂粉。

6.根据权利要求4或5所述高效诱导胚愈伤组织的培养基的配置方法，其特征在于，进一步包括以下步骤：

③加入麦芽糖，终浓度为60-90g/L。

7.根据权利要求4或5所述高效诱导胚愈伤组织的培养基的配置方法，其特征在于，进一步包括以下步骤：

③加入生长调节剂2，4-D或6-BA；终浓度为2，4-D 1.5-2.5mg/L或6-BA0.3-0.7mg/L。

8.根据权利要求4或5所述高效诱导胚愈伤组织的培养基的配置方法，其特征在于，进一步包括以下步骤：本培养基配置过程中不添加聚乙二醇。

9.根据权利要求4或5所述高效诱导胚愈伤组织的培养基的配置方法，其特征在于，进一步包括以下步骤：

③加入麦芽糖，终浓度为70-80g/L；加入生长调节剂2，4-D，终浓度为1.6-2.4mg/L。

10.根据权利要求4或5所述高效诱导胚愈伤组织的培养基的配置方法，其特征在于，进一步包括以下步骤：

③加入麦芽糖，终浓度为65-85g/L；6-BA；终浓度为0.4-0.6mg/L。